Evaluation of polymorphisms associated with recurrent miscarriage in MTHFR gene in Khuzestan province

Document Type : Research Paper

Authors
Afsaneh Karam zadeh 1
Fatemeh Bossaghzadeh 2
Mohammadreza hajjari 3
1 2) Department of Biology, Dezful Branch, lslamic Azad University, Dezful, Iran.
2 master Department of Biology, Dezful Branch, lslamic Azad university, Dezful, Iran.
3 3) Department of Biology, Faculty of Science, Shahid Chamran Univrsity of Ahvaz, Ahvaz, iran.
10.22034/cmr.2024.2254
Abstract
Background and purpose: Recurrent Pregnancy Loss (RPL) is a multifactorial disorder responsible for 15% of miscarriages. The fundamental causes of recurrent miscarriage are unknown. Research shows that MTHFR polymorphism is a main genetic risk factor for recurrent miscarriage. Accordingly, this study aimed to investigate and compare the frequency of different mutations among women with recurrent miscarriage.

Cases and Methods: In this study, 50 women with recurrent miscarriages had at least two or more miscarriages studied. In this study, two polymorphisms of the MTHFR gene had investigated by a polymerase chain reaction and product enzyme digestion (PCR) with endonuclease restriction enzymes (PCR) The results had obtained from the genotype determination of each polymorphism which had analyzed by SPSS software.

Results: Out of 50 women with recurrent miscarriage, fifteen (30%) were negative for both mutations, and 11 (22%) were both heterozygous for A> C 1298 and C> T> 677. eight patients (16%) were heterozygous, and three of them (6%) were homozygous C> T 677, and twelve (24%) were heterozygous, and just one of them (2%) were homozygous A> C 1298.

Conclusion: The results showed that mutations C677T and A1298C of the MTHFR gene have a drastic role in thrombophilia and showed a high relative frequency of these mutations in women with miscarriage.

Keywords

Subjects

بررسی پُلی­مورفیسم­های مرتبط با سقط مکرر در ژن MTHFR در استان خوزستان

افسانه کرم زاده1، فاطمه بساق­زاده1* و محمد­رضا حجاری2

1 ایران، دزفول، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد دزفول، گروه زیست‌شناسی

2 ایران، اهواز، دانشگاه شهید چمران اهواز، دانشکده علوم، گروه زیست‌شناسی

تاریخ دریافت: 03/03/1401          تاریخ پذیرش: 07/10/1401

چکیده

سقط مکرر (RPL= Recurrenl Pregnancy Loss) اختلالی چندعاملی می­باشد که سبب 15% از نارسایی‌های حاملگی است.اگرچه علل اصلی سقط مکرر ناشناخته است؛ اما تحقیقات نشان می‌دهد که متیل تترا هیدروفولات رودکتاز (MTHFR) چندشکلی از عوامل اصلی خطر ژنتیکی برای سقط مکرر است. بر این اساس، هدف از تحقیق پیش­رو بررسی و مقایسه‌ی فراوانی جهش‌های مختلف در بین زنان مبتلا به سقط مکرر جنین است. در این جُستار 50 زن مبتلا به سقط مکرر با سابقه­ی حداقل دو یا دفعات بیشتری از سقط مورد مطالعه قرار گرفتند و بررسی دو پُلی­مورفیسم ژن MTHFR  توسط الکتروفورز­موئینه و دستگاه3130XL   ABI انجام شد و نمودار فراوانی رسم گردید. از 50 مورد زن مبتلا به سقط مکرر 15 نفر معادل (30%) در هر دو جهش منفی، 11 نفر (22%) در هر دو جهش برایA>C  1298 وC>T677 هتروزیگوت، 8 نفر (16%) هتروزیگوت، 3 نفر (6%) هموزیگوت C>T 677 و 12 نفر (24%) هتروزیگوت و 1 نفر (2%) هموزیگوت A>C 1298 بودند. ن نتایج بدست آمده در این پژوهش نشان داد که جهش‌های C677T و A1298C در ژن متیل تترا هیدروفولات رودکتاز نقش بسزایی در ترومبوفیلی دارند که حاکی از فراوانی نسبی بالای جهش‌های فوق در زنان مبتلا به سقط‌جنین است.

واژه های کلیدی: سقط مکرر جنین، ترومبوفیلی، چرخه‌ی فولات، پُلی­مورفیسم ژن MTHFR،  PCR.

* نویسنده مسئول، پست الکترونیکی: Bossagh_f_1359@yahoo.com

مقدمه

 

شایع‌ترین عارضه در سه ماهه­ی اول و دوم حاملگی سقط ­جنین ­(Abortion) است. (1) بر اساس گزارش‌های موجود تقریباً 3 - 5 درصد از زنان پیشینه­ای از یک سقط دارند و تقریباً در 50 درصد زوج‌های مبتلا به سقط، با وجود ارزیابی کامل اتیولوژی علت آن ناشناخته می‌ماند. به همین دلیل این افراد در گروه سقط­هایی با دلایل ناشناخته طبقه‌بندی می‌شوند. تخمین زده‌ شده است که این دسته از زوج­ها می‌توانند بیش از 75 درصد شانس حاملگی موفق داشته باشند. (5) طبق تعریف ارائه شده از سوی سازمان بهداشت جهانی (WHO = World Health Organization) سقط‌جنین به معنای ختم حاملگی قبل از هفته‌ی 20-22 یا تولید جنینی با وزن کمتر از 500 گرم است. (7) سقط خودبه‌خودی از لحاظ بالینی انواع مختلفی دارد که یکی از آن‌ها سقط مکرر است که اگر بیش از 2 یا 3 بار متوالی تکرار گردد جنبه‌ی پاتولوژیک پیدا نموده و سقط مکرر (RPL) نامیده می‌شود که نیازمند بررسی و درمان مناسب خواهد بود. (1) حدود 1 تا 5 درصد خانم‌های باردار سقط مکرر را تجربه می‌کنند که ممکن است به دلیل نارسایی‌هایی همچون اختلالات ژنتیکی ازجمله: ناهنجاری‌های کروموزومی و تک ژنی؛ و اختلالات اسپرم باشد. (3) شواهد بسیاری وجود دارد که نشان می‌دهد ترومبوز در عروق باریک جفت می‌تواند دلیل بسیاری از سقط‌ها با علتی نامشخص باشد. (20) وجود تعادل بین انعقاد و فیبرینولیزیک، امری حیاتی در اوایل بارداری است؛ فرض ما بر این است که ترومبوفیلی به‌عنوان عاملی در پاتوفیزیولوژیRPL نقش دارد. (12) در بارداری، با افزایش عوامل پیشگیری‌کننده‌ی ضد انعقاد، در سطح ضد انعقاد، کاهشی به وجود می‌آید که منجر به انعقادی بیش از حد می­گردد. ترومبوفیلی ارثی، با عوارض مختلفی در زنان و زایمان آنان از قبیل: RPL، مرده­زایی، محدود شدن رشد جنین، پره الکلامپسی و قطع جفت همراه است (11). مستعد بودن بدن از لحاظ ژنتیکی در شکل­گیری ترومبوز وریدی و افزایش ارتفاع سطح هموسیستئین (THCY) به‌عنوان عواملی مؤثر در پاتوفیزیولوژی RPL توصیف ‌شده­اند؛ اولین فرض ما در تشخیص علت این اتفاق، پُلی­مورفیسم تک­نوکلئوتیدی اختصاصی (CNP)C در ژن‌های کد­کننده­ی عامل انعقاد از جمله عامل V-Lehden در پروتئین62020LOA است.حال آنکه دومین فرض ما شکل­گیری جهش در متیل تترا هیدروفولات رودکتاز (MTHFR) است. (14) یکی از علل ترومبوفیلی، نقص در چرخه‌ی متابولیسم هموسیستئین و افزایش میزان هموسیستئین در پلاسما است. (6) برخی عادات غذایی مانند: مصرف کافئین و چای بر تولید مثل مردان هم از نظر میزان لقاح و باروری و هم از نظر سقط‌جنین تأثیر در همسرانشان تأثیر می‌گذارد. (10) پس می­توان اذعان داشت که دریافت رژیم غذایی مناسب در اثربخشی متابولیسم هموسیستئین نقشی تعیین­کننده دارد و کاهش مصرف مواد غذایی و ویتامین B کمپلکس مانند فولات B6 و B12 منجر به افزایش سطح هموسیستئین پلاسما می‌شود. (8) علاوه بر این، کاهش غلظت اسیدفولیک و ویتامین B12 باعث افزایش هموسیستئین و به تبع آسیب عروق می‌­گردد. (16) نیاز روزانه اسیدفولیک در زنان باردار 50-100 میکروگرم است که می‌تواند در سنتز متابولیسم‌های مختلف بدن حضوری فعال داشته باشد. (13) تغییرات سطح هموسیستئین در هر دوره­ی سه ماهه­ از بارداری نشان داده است که بیشترین کاهش را در حاملگی در هفته‌های 20-28 و در حدود 3/4 میکرو مول در لیتر و بالاترین سطح را در حدود 5/5 میکرومول در لیتر در هفته‌های 36-42 داشته است. (16) دامنه­ی نرمال هموسیستئین در سرم خون 54/0-3/2 میلی‌گرم بر دسی لیتر است و درصورتی‌که این مقدار افزایش یابد برای زنان باردار بسیار خطرناک است. هموسیستئین اسیدآمینه‌­ای غیر پروتئینی است که از اسیدآمینه‌ی متیونین ایجاد می‌شود، در چنین شرایطی متیونین عامل متیل خود را در واکنش بیوشیمیایی از دست می‌دهد و تبدیل به هموسیستئین می‌شود (4). MTHFR  آنزیمی مهم که تنظیم‌کننده‌ی متابولیسم هموسیستئین (HCY) است و باعث کاتالیزور MTHFR5،10 به MTHFR 5 می‌شود. ژن کد­کننده­ی آنزیم کاتالیک MTHFR در انتهای بازوی کوتاه کروموزوم (1p36.3) قرار داشته و با 11 اگزون در طول CDNA2220  قرارگرفته است. (7)

 

 

شکل 1- جایگاه ژن MTHFR بر روی کروموزوم 1 (7)

 

جهش ژن MTHFR منجر به کاهش فعالیت آنزیم و افزایش بیش از حد هموسیستئین می‌شود که به تبع با افزایش تجمع پلاکتی و ایجاد آسیب اکسیداتیو اندوتلیال همراه می­گردد. (11) اخیراً 34 موتاسیون نادر و 9 واریانت معمولی در این ژن شناسایی شده است(19) که شامل جهش‌های C677T و A1298C دو جهش شایع در ژن MTHFR می­باشند. (11) بویژه باید یادآور گشت که SNP MTHFR C677T در متابولیسم هموسیستئین نقشی بسیار مهم دارند. (14) مطالعات چندانی روی پُلی­مورفیسم A1298C انجام نگرفته اما مشخص‌شده است که ژنوتیپ CC، عملکردی معادل 60 درصد عملکرد ژنوتیپ AA را داراست. افراد هموزیگوت برابر آلل A1298C، سطوح بالای هموسیستئین سِرمی را نشان نمی‌دهند؛ اما افراد دارای هتروزیگوت با ترکیبی از پُلی­مورفیسم­های C677T و A1298C دارای مشخصات بیوشیمیایی مشابه هموزیگوت­های C677T، با سطوح افزایش‌یافته­ی هموسیستئین و سطوح کاهش‌یافته­ی فولات یکسان هستند. (2) در جدول (1) مقایسه‌ی پُلی­مورفیسم­های C677T و A1298C ژن MTHFR نشان داده‌شده است.

 

 

جدول 1- مقایسه­ی پُلی­مورفیسم­های C677T و A1298C ژن MTHFR(7)

پلی­مورفیسم A1298C

پلی­مورفیسم C677T

%32 MTHFR

%70 MTHFR

جهش نقطه‌ای

جهش اشتباه (جابه‌جا)

در اگزون شماره‌ی 7 این ژن رخ می‌دهد.

در اگزون شماره‌ی 4 این ژن رخ می‌دهد.

باعث جابه‌جایی گلوتامات به آلانین

آلانین را به یک کدون والین تبدیل می‌کند

در کدون 429 در حوزه‌ی کنترل پروتئین C-terminal

جهش در کدون 222 در بخش N-terminal قلمرو کاتالیتیکی پروتئین

بدون تغییر دما

جهش به پروتئین حرارتی منجر می‌شود

فعالیت آنزیمی را کاهش می‌دهد.

فعالیت آنزیمی را کاهش می‌دهد از دست دادن فعالیت 50 تا 70 درصد در هموزیگوت C677T و 30 در صد از دست دادن هتروزیگوت­های C677T

 

 

هدف از تحقیق حاضر، بررسی و مقایسه‌ی فراوانی جهش‌های مختلف در بین زنان مبتلا به سقط مکرر جنین است.

مواد و روشها

بررسی ژنوتیپ: در تحقیق ­پیش­رو 50 زن مبتلا به سقط مکرر جنین از میان مراجعه‌کنندگان به آزمایشگاه ژنتیک نورژن اهواز در برهه زمانی بهمن ماه 1397 تا شهریور ماه 1398 با توجه به پرونده‌ی پزشکی بیماران و نظر متخصص زنان، با میانگین و انحراف معیار سن (27.7±5.03) و فاقد مشکلات آناتومی رحم، سیتوژنتیکی، هورمونی، ایمونولوژیک و اختلال اسپرم که حداقل 2 یا دفعات بیشتری، سقط قبل از هفته‌ی بیستم بارداری را در پرونده خود داشتند برای بررسی و پژوهش حاضر انتخاب شدند. 5 میلی‌لیتر خون محیطی از افراد انتخاب‌شده در لوله‌های حاوی EDTA گرفته شد و به روش استاندار رسوب نمکی استخراج  و برای تعیین ژنوتیپ افراد مورد بررسی از روش PCR استفاده شد. برای بررسی ژنوتیپ از کیت دیوایزر (Devyser Thrombophilia Art. No.: 8-Ao35) استفاده و برای تأیید نتایج بطور تصادفی از روش تعیین توالی توسط تکثیر قطعات مورد نظر روی برخی ژن‌ها استفاده گردید. مشخصات پرایمرهای استفاده‌شده در جدول 2 ارائه ‌شده است.

 

جدول 2- مشخصات توالی پرایمرهای نشانه‌دار پُلی­مورفیسم­های 677 و 1298 ژن MTHFR

MTHFR

1298

24mer

F: 5'-CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA- 3'

163bp

 

23mer

R: 5'-CACTTTGTGACCATTCCGGTTTG-3'

MTHFR

677

21mer

F: 5'-CTGGGGTCAGAAGCATATCAG-3'

498 bp

 

20mer

R: 5'-CTGGGAAGAACTCAGCGAAC-3'

 

 

مواد لازم برای واکنش PCR در حجم نهایی lµ20 شامل:lµ10 Tag master Mix RED (X2)، lµ10 دی استیل واتر (DW)،lµ2DNA الگو­(ژنومی) (lµgr/100) و 1 لاندا از هر جفت پرایمر MTHFR(Mµ5) بود. مراحل انجام روش PCR به ترتیب ذیل بر روی نمونه DNA از گروه بیمار و کنترل انجام شد. پس از دناتوراسیون اولیه در دمای  95 به مدت 5 دقیقه، قطعات DNA برای پُلی­مورفیسم 677،1298 در 30 سیکل ( 95 به مدت 30 ثانیه،  به مدت 30 ثانیه، 72 به مدت 30 ثانیه) تکثیر یافتند و به دنبال آن مرحله طویل سازی نهایی در دمای 4 انجام شد؛ سپس محصول PCR با استفاده از دستگاه الکتروفورزموئینه  ABI3130XL بر روی ژل آگاروز 5/1 درصد انجام شد و نمودار فراوانی رسم گردید. (2)

نتایج

آنالیز قطعات حاصله توسط دستگاه تعیین توالی: بعد از PCR، محصولات برای بررسی، مورد آنالیز توسط کاپیلاری الکتروفورز قرار گرفتند و نتایج تعیین توالی در شکل‌های 2 ،3 ،4 ،5 ،6 نشان داده شده‌اند.

بررسی فراوانی پُلی­مورفیسم­ها: با توجه به نتایج مشاهده ‌شده در الکتروفورز، ژنوتیپ هر فرد برای هر پُلی­مورفیسم مشخص شد. نتایج حاصل از فراوانی چندشکلی C677T و A1298C  و فراوانی ژنوتیپی مشاهده شده در زنان دچار سقط مکرر در جدول 3 نشان داده‌شده است.

 

 

رابطه‌ی پُلی­مورفیسم­های MTHFR با سقط مکرر

 

19912

شکل 2- تغییرc.677C>T بصورت هتروزیگوت مشاهده شد.

19928

 

شکل 3- تغییرc.A1298TC بصورت هتروزیگوت مشاهده شد.

 

19928

شکل 4- تغییرc.677C>T به‌صورت هتروزیگوت مشاهده شد.

 

19702

شکل 5- تغییرc: C677T بصورت هموزیگوت مشاهده شد.

 

19751

شکل 6- هیچ جهشی مشاهده نشد.

 

جدول 3- مقایسه­ی ژنوتیپ­ها و آلل­های پُلی­مورفیسم 677 و 1298 در ژن MTHFR در زنان دچار سقط مکرر

جهش 1298 هموزیگوت

جهش 677 هموزیگوت

جهش 1298 هتروزیگوت

جهش 677 هتروزیگوت

هر دو جهش هتروزیگوت

هر دو جهش

نرمال

آلل­ها

 پلی­مورفیسم­ها

-

-

-

-

-

15

CC

677

-

-

-

8

11

-

CT

-

3

-

-

-

-

TT

-

-

-

-

-

15

AA

1298

-

-

12

-

11

-

AC

-

-

-

-

-

-

CC

1

3

12

8

11

15

-

فراوانی نمونه‌ها

2%

6%

24%

16%

22%

30%

-

درصد فراوانی

 

 

نمودار 1- نمودار بیماران جهش­یافته در دو پلی­مورفیسم C677T و A1298C در ژن MTHFR

 

 

بحث

مطالعات انجام‌شده بر روی جوامع مختلف، عوامل مختلفی را برای سندرم سقط مکرر معرفی نموده‌اند.(4) در برخی از این مطالعات نشان داده شده است که کمبود فولات، هایپر- هموسیستئین و هموزیگوتی برای پلی­مورفیسم­های ژن MTHFR عامل خطر برای سقط خود به خودی و تخریب جفت هستند. درحالی‌که مطالعات دیگر ارتباط میان این پلی­مورفیسم­ها و سقط مکرر را رد کرده‌اند. (2) ازآنجا­یی­که نتایج واحدی از این مطالعات حاصل نشده است؛ بنابراین مطالعه‌ی عامل و ارتباط آن با سقط مکرر جنین، همچنان یکی از موضوعات موردعلاقه‌ی پژوهشگران است (6). در مطالعه‌ی حاضر، با توجه به نتایج بدست آمده نشان داده شد که جهش‌های C677T و A1298C ژن MTHFR نقش مؤثری در ترومبوفیلی دارند و مشابه با نتایج مطالعات اسکندری و همکاران در سال 2013 ارتباط معنی‌داری بین چندشکلی‌های A1298C و C677T ژن MTHFR و RPL  وجود داشت (19)؛  همچنین رودریگوئز و همکاران در سال 2009 دریافتند در افرادی که دارای ژن MTHFR C677T و MTHFR A1298C هستند، افزایش خطر سقط خودبه‌خودی در آنها بیشتر مشاهده می­گردد؛ پس در هنگام مصرف نامناسب یا عدم مصرف ویتامین B، پلی­مورفیسم MTHFR را می­توان یکی از عوامل خطرناک برای سقط خودبه‌خودی به شمار آورد. (18) در مطالعاتی دیگر کالجان و همکاران در سال 2007 در مقاله­ای با عنوان ژنوتیپ­های پلی­مورفیسم C677T و A1298C ژن MTHFR  به بررسی از دست دادن جنین به شیوه خودبه‌خودی در انسان پرداختند و به این نتیجه رسیدند که زنده ماندن جنین به‌طور مستقیم به ژنوتیپ CC عامل محافظت کننده جنین ارتباطی ویژه دارد. اگرچه به نظر می‌رسد ژنوتیپ MTHFR سه جهش، عاملی تعیین‌کننده در مرگ جنین و SA است. (9) تایواری و همکاران در سال 2015 جهش ژن پلی­مورفیسم MTHFR  را به‌عنوان عاملی ژنتیکی در زایمان زودرس و مرگ جنین با وزن کم هنگام تولد، در جمعیت شمال شرقی هند بررسی کردند. یافته‌های آن­ها نشان داد جهش ژن پلی­مورفیسمMTHFR C677T خطر زایمان زودرس را افزایش می‌دهد و ممکن است به‌عنوان نشانگری تشخیصی در حاملگی‌هایی که مستعد زایمان زودرس باشند، استفاده گردد؛ بنابراین بدین­گونه خطرات مرتبط به زایمان زودرس قابل کنترل است (20). در منطقه‌ی کولار واقع در جنوب غربی هند، وانیلا و همکاران در سال 2015 پژوهشی با عنوان شواهدی مبنی بر دخیل بودن عوامل خطر از سوی پدر برای نوزاد را بر پلی­مورفیسم C677T ژن  MTHFR5،10 در زوجینی که دارای سقط مکرر RSAS هستند را نشان داد که پس از بررسی درنهایت مشاهده گردید که بسامد بالایی به‌طور خالص آلل T ژن MTHFR مربوط به پدر عامل سقط مکرر است؛ بنابراین، مطالعه‌ی حاضر تأثیر پلی­مورفیسم C677T ژن MTHFR  از سوی پدر نوزاد در غربالگری زوجینی که دچار سقط مکرر می‌شوند را نشان می‌دهد (21). بالاسوبرامانیام و همکاران در سال 2017 در پژوهشی به تجزیه و تحلیل پلی­مورفیسم­های MTHFR در حاملگی و سقط مکرر به این نتیجه رسیدند که مطالعات بیشتر نشان می‌دهد غربالگری پدران به اندازه‌ی غربالگری مادران در تشخیص اولیه‌ی سقط مکرر حائز اهمیت است (5). رای در سال 2016 به مطالعه‌ی آنالیز پلی­مورفیسم C677T MTHFR و خطر سقط مکرر در جمعیت­های آسیایی پرداخت و اذعان داشت که آنالیز­ها نشان می‌دهد ارتباط قوی بین T 677 MTHFR C و RPL در جمعیت آسیا و افزایش اهمیت استفاده از فولات در درمان پیشگیری از آن را نشان می‌دهد (17).  نایر و همکاران در سال 2013 در مطالعه‌ی آنالیز ارتباط پلی­مورفیسم A1298C ژن MTHFR در درمان و سقط‌جنین در جمعیت هند به بررسی ارتباط ژنتیکی میان MTHFR با پلی­مورفیسم A1298C و سقط مکرر پرداختند، نتایج آن‌ها نشان داد که چندشکلی A1298C MTHFR عاملی ژنتیکی در سقط جنین است (15). خالق­پرست و همکاران در سال 2011 در مطالعه‌ای به بررسی ارتباط میان دو پلی­مورفیسم C677T و A1298C در ژن MTHFR با سندرم سقط مکرر پرداختند و نتایج بدست آمده در این پژوهش نیز نشان داد هیچ‌ یک از دو پلی­مورفیسم MTHFR نمی‌توانند توجیه‌کننده علت سقط مکرر در زنان مورد بررسی گردند (2). هوانگ و همکاران در سال 2017 در پژوهشی به بررسی MTHFR با خطر سقط مکرر در جمعیت کره پرداختند و بیان داشتند جهش MTHFR ژن C677T  و A1298C با سقط مکرر ایدوپاتیک در زنان کره‌ای ارتباطی ندارد و این اتفاق نشان­دهنده آن است که این افراد ممکن است به‌ آلل حساس نباشند و با آسیب سقط مکرر مواجه نشوند (10). فابیول و همکاران در سال 2014 در مطالعه­ا‌ی جهش‌های ترومبوفیلی و چندشکلی، به‌تنهایی یا در حالتی ترکیبی را، در سقط مکرر خودبه‌خودی بررسی کرده و بیان داشتند که هیچ ارتباطی میان پلی­مورفیسم­های موردم طالعه بر روی RSA دیده نشده است (12).  لیو و همکاران در سال 2020 در پژوهشی به بررسی ارتباط بین نقایص مادرزادی هنگام تولد و چندشکلی ژن آنزیم متابولیک فولات در کودکان پرداختند و بیان داشتند که پلی­مورفیسم فولات می‌تواند به‌طور مستقیم در نقص تولد نوزاد دخیل باشد و تقویت پلی­مورفیسم آنزیم متابولیسم فولات تعیین HCY با توجه به توانایی استفاده از اسیدفولیک، بروز نقایص هنگام تولد را در نوزاد کاهش می‌دهد (13). ییلا و همکاران در سال 2012 بیان کردند که آلل C677T ژن MTHFR با کم شدن فولات ارتباطی مستقیم دارد (22). سنبلستان و همکاران در سال 2018 در بررسی پلی­مورفیسم C677T ژن MTHFR با میزان هموسیستئین در زنان مبتلا به ناباروری اولیه و ثانویه در استان اصفهان به این نتیجه رسیدند که وجود پلی­مورفیسم C677T ژن MTHFR می‌تواند با افزایش سطح هموسیستئین و کاهش سطح اسیدفولیک و ویتامین موجب ایجاد سندرم سقط مکرر جنین گردد (4).

نتیجه‌گیری

نتایج بدست آمده در این پژوهش نشان داد که جهش‌های C677T و A1298C ژن MTHFR نقشی مؤثر در ترومبوفیلی دارند و بررسی­ها حاکی از فراوانی نسبی بالای جهش‌های فوق در زنان مبتلا به سقط‌جنین را داشت. بر اساس مقالات گزارش‌شده غربالگری پدران همانند غربالگری مادران از اهمیت ویژه‌­ای برخوردار ‌است. جهش در پلی­مورفیسم C677T نسبت به A1298C بیشتر بوده و نیاز است در زمینه‌ی پلی­مورفیسم A1298C مطالعات ویژه­ای صورت پذیرد.

تشکر و قدردانی

کمال تشکر از سرکار خانم دکتر فاطمه بساق­زاده و آقای دکتر محمدرضا حجاری و کارشناس آزمایشگاه نورژن اهواز آقای محمدحسین ماسبی و همکاران ایشان که در انجام این پژوهش یاری کردند ابراز می‌دارم.

1- اسکندری، فاطمه؛ اکبری، محمدتقی؛ زارع­کاریزی، شهره (2013) «بررسی ارتباط چندشکلی‌های C677T و A1298C ژنMTHFR  با سقط مکرر جنین» نشریه پژوهنده، (4) 18، 167-173.
2- اشکان، سیدامین؛ ذاکربستان­آباد، سعید؛ میرزااحمدی، سینا (1397) «بررسی ارتباط بین پلی­مورفیسم ژن‌های دستگاه  (DROSHA & EXPORTIN5) miRNA و سقط مکرر خودبه‌خودی در شهر تهران» مجله تازه‌های بیوتکنولوژی سلولی-مولکولی 8.30، 45-52.
3- خالق­پرست، امین؛ مروتی، سعید؛ نورمحمدی، زهرا (1390) « ارتباط دو پلی­مورفیسم C677T و A1298C در ژنMTHFR  با سندروم سقط مکرر» 88-95.
4- زارع کاریزی، شهره و میرفخرایی (1397): "مطالعه همراهی چندشکلی‌های  rs3024998و rs699947 در ژن VEGF با خطر بروز سقط مکرر جنین." دانش زیستی ایران 12.4: 1-8.‎
5- سنبلستان، الهام­سادات؛ سازگار، حسین؛ ضیاءجهرمی، نوشا؛ محمدی­فارسانی، فرزانه (1397) « ارتباط پلـی‌مورفیسـمC677T  ژن متیلن تتراهیدروفولات ردوکتاز با میـزان هموسیستئیـن در زنان مبتلا به ناباروری اولیه و ثانویه در استان اصفهـان» مجله دانشگاه علوم پزشکی فسا 8،1 ، 647-656.‎
6- ولیان بروجنی و صادق (1393) «ارزیابی سقط مکرر و اهمیت عوامل ژنتیکی» آزمایشگاه و تشخیص 6.25 ،36-41.‎
 
7- Balasubramaniam, A. Kotalawala, S. & Amarasekara, R. (2017). Analysis of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) Polymorphisms (C677t & A1298c) in recurrent pregnancy loss (RPL). J Gynecol, 1(4), 1-5.
8- Boas, W. V. Gonçalves, R. O., Costa, O. L. N., & Goncalves, M. S. (2015). Metabolism and gene polymorphisms of the folate pathway in Brazilian women with history of recurrent abortion. Revista Brasileira de Ginecologia e Obstetrícia, 37, 71-76.
9- Callejon, G., Mayor-Olea, A., Jimenez, A. J., Gaitán, M. J., Palomares, A. R., Martínez, F., ... & Reyes-Engel, A. (2007). Genotypes of the C677T and A1298C polymorphisms of the MTHFR gene as a cause of human spontaneous embryo loss. Human reproduction, 22(12), 3249-3254.
10- Franzago, M., Santurbano, D., Vitacolonna, E., & Stuppia, L.(2020). Genes and diet in the prevention of chronic diseases in future generations. International journal of molecular sciences, 21(7), 2633.
11- Hwang, K. R., Choi, Y. M., Kim, J. J., Lee, S. K., Yang, K. M., Paik, E. C., ... & Hong, M. A. (2017). Methylenetetrahydrofolate reductase polymorphisms and risk of recurrent pregnancy loss: a case-control study. Journal of Korean medical science, 32(12), 2029-2034.
12- Lino, F. L., Traina, É., Barreto, J. A., Moron, A. F., & Mattar, R. (2015). Thrombophilic mutations and polymorphisms, alone or in combination, and recurrent spontaneous abortion. Clinical and Applied Thrombosis/Hemostasis, 21(4), 365-372.
13- Liu, J. (2020). Association Analysis between Birth Defects and Folate Metabolic Enzyme Gene Polymorphism in Children. Archivos Latinoamericanos de Nutrición, 70 (1).
14- Mtiraoui, N., Zammiti, W., Ghazouani, L., Braham, N. J., Saidi, S., Finan, R. R., ... & Mahjoub, T. (2006). Methylenetetrahydrofolate reductase C677T and A1298C polymorphism and changes in homocysteine concentrations in women with idiopathic recurrent pregnancy losses. Reproduction, 131(2), 395-401.
15- Nair, R. R., Khanna, A., Singh, R., & Singh, K. (2013). Association of maternal and fetal MTHFR A1298C polymorphism with the risk of pregnancy loss: a study of an Indian population and a meta-analysis. Fertility and sterility, 99(5), 1311-1318.
16- Noori, N., Najafian, A., Saberi,S.,& Ghasemi, M.(2020). Measurement of  Homocysteine Levels in Pregnant Women with and Without Preeclampsia. Journal of  Pharmaceutical Research International,74-   80.
17- Rai,V.(2016). Methylenetetrahydrofolate reductase C677T polymorphism and recurrent pregnancy loss risk in Asian population:a meta-analysis.Indian Journal of Clinical Biochemistry,31(4), 402-413.
18- Rodríguez-Guillén, M. D. R., Torres-Sánchez, L., Chen, J., Galván-Portillo, M., Blanco-Muñoz, J., Anaya, M. A., ... & López-Carrillo, L. (2009). Maternal MTHFR polymorphisms and risk of spontaneous abortion. Salud Pública de México, 51, 19-25.
19- Santos, W. V. B., Gonçalves, R. O., Costa, O. L. N., & Gonçalves, M. D. S. (2015). Metabolism and gene polymorphisms of the folate pathway in Brazilian women with history of recurrent abortion.
20- Tiwari, D., Bose, P. D., Das, S., Das, C. R., Datta, R., & Bose, S. (2015). MTHFR (C677T) polymorphism and PR (PROGINS) mutation as genetic factors for preterm delivery, fetal death and low birth weight: A Northeast Indian population based study. Meta Gene, 3, 31-42.
21- Vanilla, S., Dayanand, C. D., Kotur, P. F., Kutty, M. A., & Vegi, P. K. (2015). Evidence of paternal N5, N10-methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C677T gene polymorphism in couples with recurrent spontaneous abortions (RSAs) in Kolar district-A south west of India. Journal of clinical and diagnostic research: JCDR, 9(2), BC15.
22- Yila, T. A., Sasaki, S., Miyashita, C., Braimoh, T. S., Kashino, I., Kobayashi, S., ... & Kishi, R. (2012). Effects of maternal 5, 10-methylenetetrahydrofolate reductase C677T and A1298C Polymorphisms and tobacco smoking on infant birth weight in a Japanese population. Journal of epidemiology, 22(2), 91-102.
Cellular and Molecular Research (Iranian Journal of Biology)
Volume 37, Issue 3
Autumn 2024
Pages 289-303

  • Receive Date 05 October 2021
  • Revise Date 05 July 2022
  • Accept Date 06 December 2022