نوع مقاله : مقاله پژوهشی
کلیدواژهها
موضوعات
عنوان مقاله English
نویسندگان English
Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common cancer among children. Our previous study on the cytotoxic effect of ginger extract (Zingiber officinale Rosc.) demonstrated the anti-leukemic effects of ginger extract on ALL cells. 6-Shogaol, the most active derivative of ginger extract, inhibits the growth and proliferation of cancer cells, by affecting the expression of genes involved in the cell cycle and apoptosis. The purpose of this study was to investigate the effect of 6-shogaol on the expression of FASN (Fatty acid synthase) via Insig1(Insulin induced gene 1) gene over expression, in acute lymphoblastic leukemia cells, in order to find the molecular pathways related to this drug derivative. CCRF-CEM, R-CCRF-CEM, Nalm-6 and RN95 were treated with increasing concentrations of 6-shogaol. The cell viability was determined using MTT assay and the rate of cell death was assessed by trypan blue staining assay. The mRNA expression levels of FASN and Insig1 genes were evaluated using real-time PCR. Statistical analyses were performed using the GraphPad Prism 6 software. Results presented 6-shogaol significantly decrease R-CCRF-CEM, Nalm-6 and RN95 cells viability. This inhibitory effect was greater in R-CCRF-CEM and Nalm-6 than in CCRF-CEM. Moreover, 6-shogaol reduces FASN expression significantly, but it did not show a significant effect on the expression of Insig1, so this drug derivative may induce its anti-cancer effect by affecting other molecular pathways.
کلیدواژهها English
بررسی اثر6-شگول بر بیان ژن های Insig1 و FASN در رده ی سلولی سرطان خون لفنوبلاستی حاد Nalm-6
سمیه نجفی درچه و سهیلا رهگذر*
ایران، اصفهان، دانشگاه اصفهان، دانشکده علوم و فناوری های زیستی، گروه زیست شناسی سلولی مولکولی و میکروبیولوژی
تاریخ دریافت: 07/06/1400 تاریخ پذیرش: 14/01/1401
چکیده
سرطان خون لنفوبلاستی حاد (ALL: Acute lymphoblastic leukemia) شایعترین سرطان در میان کودکان است. تیم تحقیقاتی ما با بررسی اثر سیتوتوکسیک عصارهزنجبیل (Zingiber officinale Rosc.) بر سلولهای ALL نشان داد، زنجبیل دارای اثر ضدسرطانی قوی در این سلولها میباشد. 6-شگول به عنوان یکی از مشتقات فعال زنجبیل با اثر بر میزان بیان ژنهای دخیل در چرخهسلولی و آپوپتوز سبب ممانعت از رشد و تکثیر سلولهای سرطانی میشود. هدف از این مطالعه بررسی اثر 6-شگول بر میزان بیان FASN (Fatty acid synthase)، از طریق افزایش بیان ژن Insig1 (Insulin induced gene 1) در سلولهای سرطانی ALL، بمنظور یافتن مسیرهای مولکولی مرتبط با این مشتق دارویی میباشد. در این مطالعه ردههای سلولی Nalm-6، RN95، CCRF-CEM و R-CCRF-CEM با غلظتهای افزایشی 6-شگول تیمار شدند. درصد زندهمانی با روش MTT و میزان مرگ سلولی با روش رنگ آمیزی تریپان بلو ارزیابی شدند. اثر 6-شگول بر میزان بیان ژنهای FASN و Insig1 با استفاده از تکنیک real-time PCR مورد بررسی قرار گرفت. جهت تجزیه و تحلیل دادهها از نرمافزار Graph Pad Prism 6 استفاده شد. نتایج این پژوهش نشان داد 6-شگول به طور معنیداری سبب کاهش درصد زندهمانی ردههای سلولی Nalm-6، RN95 و R-CCRF-CEM میشود. این اثر مهاری در ردههای سلولی R-CCRF-CEM و Nalm-6 نسبت به رده سلولی CCRF-CEM بیشتر بود. اضافه بر این، 6-شگول به طور معنیداری سبب کاهش بیان ژن FASN میشود درحالیکه اثر معنیداری بر میزان بیان نسبی ژن Insig1 نشان نداد، بنابراین ممکن است این مشتق دارویی اثر ضدسرطانی خود را با تأثیر بر سایر مسیرهای مولکولی القا کند.
واژه های کلیدی: سرطان خون لنفوبلاستی حاد، عصاره زنجبیل(Zingiber officinale Rosc.)، 6-شگول، ژن FASN، ژن Insig1
* نویسنده مسئول، تلفن: 03137932457 ، پست الکترونیکی: rahgozar@sci.ui.ac.ir
مقدمه
سرطان خون لنفوبلاستی حاد (ALL: Acute lymphoblastic leukemia) شایع ترین بدخیمی در بین کودکان بوده که از سلول های پیش ساز رده لنفوسیتی B یا T نشأت گرفته و با درنظر گرفتن خصوصیات مورفولوژیک و ایمونوفنوتایپی به دو نوع اصلی B-ALL و T-ALL تقسیم می شود (16).
استفاده از داروهای شیمی درمانی به عنوان روش معمول درمان سرطان، سبب بروز عوارض جانبی بسیاری مانند کاهش تعداد سلول های خونی و پلاکت ها، تهوع، استفراغ، اسهال، ریزش مو و مهار سیستم ایمنی می شود (13). گیاهان دارویی به صورت منفرد و یا در ترکیب با داروهای شیمی درمانی سبب افزایش اثرات ضدسرطانی این داروها و کاهش عوارض جانبی ناشی از استفاده از این داروها می شوند. گیاهان دارویی با اثر بر مسیرهای مولکولی متفاوت، به طور همزمان بر فازهای مختلف بیماری تأثیر می گذارند (20). علاوه بر خاصیت ضد سرطانی، گیاهان دارویی دارای خواص ضد التهابی (11) و آنتی اکسیدانی (22) نیز می باشند.
زنجبیل یکی از گیاهان دارویی است که در درمان بیماری های بسیاری از جمله، سرطان، بیماری های قلبی-عروقی، دیابت و رفع حالت تهوع و استفراغ مورد استفاده قرار می گیرد (7 و 14 و 19 و 26). مطالعات نشان می دهند زنجبیل و مشتقات آن دارای اثر ضد سرطانی در سرطان های کلون، پوست، کبد، تخمدان، معده و سینه می باشند (7). مطالعات پیشین تیم تحقیقاتی ما نشان داد عصاره زنجبیل دارای اثر سیتوتوکسیک بر رده های سلولی ALL و سلول های بدخیم کودکان مبتلا به ALL است (5). علاوه بر این بررسی اثر 10-جینجرول، از دیگر مشتقات فعال زنجبیل، بر رده های سلولی ALL نشان داد این مشتق دارویی با کاهش درصد زنده مانی و القای آپوپتوز سبب اثرات سیتوتوکسیک می شود (3).
مطالعات نشان می دهند در میان انواع مشتقات شگول، از ترکیبات فعال زنجبیل، 6-شگول، دارای اثر ضد سرطانی قوی تری در انواع سرطان هاست (15 و 23). 6-شگول با اثر بر مسیرهای مولکولی متفاوتی همچون PI3K، NFκB، JAK/STAT، MAPK، Notch1 و PPARγ سبب مهار رشد و تکثیرسلول های سرطانی می شود (18 و 24 و 25). 6-شگول به عنوان لیگاند سبب فعال شدن PPARγ و درنتیجه افزایش بیان ژن های تحت تنظیم این فاکتور رونویسی از جمله ژن Insig1 (Insulin induced gene 1) می شود (24). Insig1 با اتصال به پروتئین SCAP (SREBP activating protein) سبب مهار پردازش و در نتیجه ممانعت از فعالیت فاکتور رونویسی SREBP-1c (Sterol regulatory element-binding protein-1c) می شود (9). از آن جایی که SREBP-1c یکی از فاکتورهای رونویسی ژن فتی اسید سنتاز (FASN, Fatty acid synthase) است، با افزایش بیان insig1، میزان بیان ژن FASN کاهش می یابد. فتی اسید سنتاز (FASN)، یک آنزیم کلیدی در تولید پالمیتات، در سلول های سرطانی افزایش بیان یافته و سبب رشد و تکثیر بیشتر و مهار آپوپتوز در این سلول ها می شود. براساس مطالعات قبلی تیم تحقیقاتی ما ژن FASN در سلول های سرطانی ALL افزایش بیان یافته و تیمار با عصاره زنجبیل سبب کاهش بیان این آنزیم در سلول های ALL می شود (10).
در این پژوهش پس از بررسی اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر رده های سلولی ALL و انتخاب حساس ترین رده سلولی، بمنظور یافتن مکانیسم مولکولی مرتبط با این مشتق دارویی، اثر 6-شگول بر میزان بیان ژن های FASN و Insig1 مورد بررسی قرار گرفت.
مواد و روشها
رده های سلولی: رده های سلولی CCRF-CEM (از نوع T-ALL) و Nalm-6 (از نوع B-ALL) از بانک سلولی انستیتو پاستور ایران خریداری شدند. رده های سلولی R-CCRF-CEM (رده سلولی T-ALL مقاوم به داروی شیمی درمانی متوترکسات) و RN95 (رده سلولی B-ALL مقاوم به داروی شیمی درمانی سایتارابین) توسط تیم تحقیقاتی ما در دانشگاه اصفهان تولید شدند. شماره ثبت اختراع این رده ها، در سازمان ثبت اسناد و املاک کشور به ترتیب 98824 و 100281 می باشند.
سلول ها در محیط کشت کامل RPMI1640، حاوی 10 درصد FBS (Fetal bovine serum) و 1 درصد آنتی بیوتیک پنی سیلین - استرپتومایسین کشت داده شدند. محیط کشت کامل برای رده سلولی Nalm-6 حاوی 1 درصد ال گلوتامین و برای R-CCRF-CEM حاوی 2/1 میکرومولار متوترکسات نیز بود.
تیمار رده های سلولی با غلظت های مختلف 6-شگول: تعداد 104 × 2 سلول در هر چاهک از پلیت 96 خانه در 100 میکرولیتر محیط کشت حاوی FBS کشت داده شدند. بمنظور بررسی اثر سیتوتوکسیک 6-شگول، سلول ها با 50 میکرولیتر غلظت های افزایشی 6-شگول (Adooq, Irvine, CA) تیمار شدند. سلول های گروه کنترل با DMSOی 4/0 درصد (به عنوان حلال 6-شگول) تیمار شدند. پلیت ها متناسب با زمان دو برابر شدن رده های سلولی در انکوباتور 37 درجه سانتی گراد و CO2 5 درصد قرار داده شد و سپس درصد زنده مانی سلول ها با روش MTT سنجیده شد. آزمایش ها 3 بار انجام شدند و نمونه ها در هر آزمایش به صورت 3 بار تکرار تیمار شدند.
سنجش میزان زنده مانی با روش MTT : بمنظور تعیین میزان زنده مانی سلول ها از روش MTT (Atocel; Graz, Austria) استفاده می شود. در این روش پس از پایان زمان انکوباسیون، 10 میکرولیتر از محلول MTT (5 میلی گرم در میلی لیتر) به هر چاهک از پلیت 96 خانه اضافه شده و پلیت کشت سلولی به مدت 3 ساعت در انکوباتور 37 درجه سانتی گراد قرار داده شد. سپس محلول رویی حذف شده و با افزودن 100 میکرولیتر DMSO، بلورهای به وجود آمده در کف هر چاهک حل شدند. جذب نوری هر چاهک با استفاده از یک دستگاه پلیت ریدر و در طول موج 492 نانومتر خوانده شد.
بررسی درصد مرگ سلولی با تریپان بلو: پس از تیمار سلول ها با مشتق دارویی 6-شگول، حجم برابری از تریپان بلو (Sigma, Munich, Germany) و سوسپانسیون سلولی را پیپت کرده و پس از 1 الی 2 دقیقه، 10 میکرولیتر از مخلوط بر روی لام نئوبار شمارش شدند. به دلیل خاصیت نفوذپذیری انتخابی غشای پلاسمایی سلول و از آن جایی که تریپان بلو دارای بار منفی است، این رنگ نمی تواند از غشای سلول های سالم عبور نمی کند، در حالی که در سلول های مرده، رنگ به راحتی وارد سلول می شود. بنابراین در این روش سلول های سالم در زیر میکروسکوپ، بدون رنگ و سلول های مرده آبی رنگ می باشند. پس از شمارش سلول های زنده و کل سلول ها (زنده و مرده)، درصد زنده مانی تعیین شد.
بررسی اثر 6-شگول بر میزان بیان ژن با روش real-time PCR : استخراج RNA کل، حذف DNA ژنومی و ساخت cDNA بترتیب با استفاده از محلول ترایزول (Invitrogen, Carlsbad, CA) و کیت تاکارا (Shiga, Japan)، مطابق با دستورالعمل های شرکت سازنده، انجام شدند. بیان ژن با استفاده از کیت سایبر گرین (Ampliqon RealQ Plus Master Mix Green high ROX™ , Copenhagen, Denmark) مورد بررسی قرار گرفت. هر آزمایش 2 بار انجام شد و در هر آزمایش نمونه ها به صورت 3 بار تکرار بودند. توالی پرایمرهای مورد استفاده در جدول 1 قابل مشاهده است.
جدول 1- خصوصیات آغازگرهای مورد استفاده برای ژن های مورد نظر
|
ژن |
توالی آغازگر (5' " 3') |
طول آغازگر (جفت باز) |
طول محصول (جفت باز) |
دمای ذوب |
درصد GC |
|
|
Insig1 |
F:AATGTCACTCTCTTCCCCGAGGAGG R:ACAGGGGTACAGTAGGCCAACAACAG |
25 26 |
111 |
36/65 24/66 |
56 85/53 |
|
|
FASN |
F:CCGCTTCCGAGATTCCATCCTACGC R:GGATGGCAGTCAGGCTCACAAACG |
25 24 |
137 |
13/67 19/66 |
60 3/58 |
|
|
GAPDH |
F:GCCCCAGCAAGAGCACAAGAGGAAGA R:CATGGCAACTGTGAGGAGGGGAGATT |
26 26 |
106 |
64/68 38/66 |
69/57 85/53 |
|
در این آزمایش از GAPDH به عنوان ژن خانه گردان استفاده شد. از روش -ΔΔCt 2 برای محاسبه میزان بیان نسبی استفاده شد.
تجزیه و تحلیل داده ها: تجزیه و تحلیل داده ها با استفاده از نرم افزار Graph Pad Prism 6، انجام شد. نتایج به دست آمده به صورت میانگین تکرار ها و با شاخص آماری انحراف معیار SEM، گزارش شده اند. گروه ها با کمک آزمون یک طرفه ANOVA و t-test مورد بررسی قرار گرفتند. P کمتر از 05/0 به عنوان اختلاف آماری معنادار بین گروه های مورد بررسی در نظر گرفته شد. حروف a تا e در شکل های 1، 2 و4، بترتیب نشان دهنده ارتباط معنی دار با گروه کنترل و غلظت های 10 تا 100 میکرومولار 6-شگول میباشند. حرف a در شکل 3 نشان دهنده ارتباط معنی دار ستون های خاکستری رنگ (رده های سلولی R-CCRF-CEM یا Nalm-6) با ستون های مشکی رنگ (رده سلولی CCRF-CEM) است.
نتایج
بررسی اثر 6-شگول بر رده های سلولی ALL
پس از تیمار رده های سلولی CCRF-CEM، R-CCRF-CEM، Nalm-6 و RN95 با غلظت های افزایشی 6-شگول، درصد زنده مانی سلول ها با روش آزمون MTT محاسبه شد. نتایج حاکی از اثر سیتوتوکسیک مشتق دارویی 6-شگول در غلظت های بالا بر رده های سلولی R-CCRF-CEM، Nalm-6 و RN95 بود. از آن جایی که ایمنوفنوتایپ B-ALL، با نرخ 85 درصد از کل ALL ها در میان کودکان، شایع تر است (16) و رده سلولی Nalm-6 در غلظت های بالای 6-شگول بیشترین حساسیت را نشان داد، این رده برای ادامه پژوهش انتخاب شد. علاوه بر این غلظت 200 میکرومولار 6-شگول نیز برای ادامه کار درنظر گرفته شد (شکل 1).
شکل 1- بررسی اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر رده های سلولی ALL. 104 × 2 سلول با غلظت های افزایشی 6-شگول و یا DMSO ی 4/0 درصد (به عنوان حلال 6-شگول) تیمار شدند و میزان درصد زنده مانی با آزمون MTT بررسی شد. نمودارهای الف تا د بترتیب مربوط به رده های سلولی CCRF-CEM، R-CCRF-CEM، Nalm-6 و RN95 می باشند. 6-شگول در غلظت های بالا سبب کاهش زنده مانی رده های سلولی R-CCRF-CEM، Nalm-6 و RN95 شد. غلظت 200 میکرومولار 6-شگول، بیشترین اثر سیتوتوکسیک را بر رده سلولی Nalm-6 نشان داد.
بمنظور تایید نتایج به دست آمده از آزمون MTT، میزان مرگ سلول های Nalm-6 تیمار شده با غلظت 200 میکرومولار 6-شگول، با تریپان بلو نیز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج به دست آمده با این روش نیز نشان داد، 6-شگول سبب افزایش میزان مرگ سلول های Nalm-6 میشود (شکل 2).
مقایسه اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر زنده مانی رده های سلولی ALL : مقایسه میزان اثر مهاری 6-شگول در رده های سلولی ALL نشان داد، 6-شگول اثر سیتوتوکسیک بیشتری بر رده سلولی R-CCRF-CEM نسبت به رده سلولی CCRF-CEM داشت (شکل 3-الف). اضافه بر این، غلظت 200 میکرومولار 6-شگول اثر مهاری بیشتری بر زنده مانی رده سلولی Nalm-6 نسبت به رده سلولی CCRF-CEM نشان داد (شکل 3-ب).
شکل 2- بررسی میزان زنده مانی سلول های Nalm-6 متعاقب تیمار با 6-شگول با روش رنگ آمیزی با تریپان بلو. غلظت 200 میکرومولار 6-شگول سبب کاهش درصد زنده مانی سلول های Nalm-6 میشود.
شکل 3- مقایسه اثر 6-شگول بر زنده مانی رده های سلولی ALL. الف) مقایسه میزان زنده مانی رده ی سلولی CCRF-CEM (ستون مشکی رنگ) و رده سلولی R-CCRF-CEM (ستون خاکستری رنگ) تحت تیمار با غلظت های مختلف 6-شگول، نشان دهنده اثر سیتوتوکسیک قوی تر 6-شگول بر رده ی مقاوم بود. ب) غلظت 200 میکرومولار 6-شگول، اثر سیتوتوکسیک قوی تری بر رده سلولی Nalm-6 (ستون خاکستری رنگ) نسبت به رده ی سلولی CCRF-CEM (ستون مشکی رنگ) نشان داد.
بررسی اثر 6-شگول بر میزان بیان ژن های FASNو Insig1 : بمنظور تعیین ژن های هدف احتمالی 6-شگول، سلول های Nalm-6 با غلظت 200 میکرومولار 6-شگول تیمار شدند. سپس RNA کل استخراج و پس از سنتز cDNA از سلول های گروه کنترل و تیمار، میزان بیان ژن های FASN و Insig1 با استفاده از روش real-time PCR بررسی شد. نتایج نشان داد 6-شگول سبب کاهش معنی دار بیان ژن FASN در سلول های تحت تیمار نسبت به گروه کنترل می شود. در حالی که افزایش سطح بیان ژن Insig1در گروه تیمار با 6-شگول نسبت به گروه کنترل معنی دار نبود (شکل 4).
بحث
با وجودی که استفاده از داروهای شیمی درمانی اثربخشی بالایی را در درمان سرطان نشان می دهد، این داروها سلول های طبیعی بدن را نیز تحت تاثیر قرار داده و بنابراین سبب
بروز عوارض جانبی بسیاری می شوند (21).
شکل 4- مقایسه پروفایل بیانی ژن های FASN و Insig1 در سلول های تیمار شده با 6-شگول در مقایسه با گروه کنترل. سلول های Nalm-6 با غلظت 200 میکرومولار 6-شگول تیمار شده و پس از استخراج RNA کل و سنتز cDNA، میزان بیان به وسیله real-time PCR بررسی شد.
مطالعات نشان می دهد گیاهان دارویی سبب کاهش بقا و القای آپوپتوز در سلول های سرطانی معده و کلون می شوند (1 و 2). زنجبیل به عنوان یکی از گیاهان دارویی که اثر ضد سرطانی آن در انواع مختلفی از سرطان ها به اثبات رسیده است، دارای ترکیبات متنوعی می باشد. در این مطالعه اثر 6-شگول بر سلول های ALL و تاثیر این مشتق دارویی بر میزان بیان ژن FASNاز طریق افزایش بیان ژن Insig1 برای اولین بار، مورد بررسی قرار گرفت.
در پژوهش حاضر بررسی اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر رده های سلولی ALL، نشان داد 6-شگول در غلظت های بالا سبب مهار زنده مانی رده های سلولی R-CCRF-CEM، Nalm-6 و RN95 می شود (شکل 1). نتایج حاصل از بررسی میزان مرگ سلولی با روش رنگ آمیزی با تریپان بلو نیز با نتایج حاصل از آزمون MTT همخوانی داشت (شکل 2). در مطالعات قبلی نیز اثر مهاری 6-شگول بر زنده مانی رده های سلولی سرطان های ریه، کلون و پروستات، به اثبات رسیده است (15 و 23).
در این مطالعه مشخص شد اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر رده سلولی R-CCRF-CEM نسبت به رده سلولی CCRF-CEM بیشتر است (شکل 3-الف). یکی از مکانیسم هایی که در رده سلولی R-CCRF-CEM می تواند سبب مقاومت دارویی شود، افزایش بیان MDR1 می باشد. بررسی میزان بیان ژن های مرتبط با مقاومت دارویی در سلول های بدخیم بیماران مبتلا به ALL، حاکی از افزایش بیان ژن MDR1 در بیماران mrd+ و درنتیجه انتقال رو به خارج دارو از سلول و مقاومت دارویی است (17). از آن جایی که MDR1 یکی از اهداف فاکتور رونویسی NF-κB می باشد (6). و پژوهش ها نشان می دهد 6-شگول سبب مهار فعالیت NF-κBمی شود، بنابراین 6-شگول می تواند اثر مهاری خود را بر زنده مانی سلول های R-CCRF-CEM، از طریق این مسیر نیز ایفا کنند. لازم به ذکر است جهت اثبات ادعای ذکر شده، مطالعات بیشتری مورد نیاز است.
اضافه بر این، در این مطالعه نشان داده شد اثر سیتوتوکسیک غلظت 200 میکرومولار 6-شگول بر رده سلولی Nalm-6 از CCRF-CEM بیشتر می باشد (شکل 3-ب). با توجه به این که ژن p53 در رده سلولی CCRF-CEM به صورت جهش یافته می باشد (8). بنابراین فعالیت مشتق دارویی 6-شگول از طریق مسیر پیام رسانی p53 در این رده سلولی مهار می شود. علاوه بر این، مطالعات نشان می دهد، میزان بیان ژن STAT3 به طور معنی داری در بیماران B-ALL نسبت به بیماران T-ALL بیشتر است (4). از آن جایی که 6-شگول مهارکننده STAT3 می باشد (25)، ممکن است اثر سیتوتوکسیک قوی تر 6-شگول بر رده سلولی Nalm-6 نسبت به رده سلولی CCRF-CEM به علت فعالیت بیشتر مسیر STAT3 در رده Nalm-6 باشد. جهت اثبات این ادعا نیز مطالعات و تحقیقات بیشتری مورد نیاز است.
در این پژوهش مشخص شد، 6-شگول سبب کاهش میزان بیان ژن FASN در سلول های Nalm-6 می شود (شکل 4). بررسی میزان بیان آنزیم FASN در سلول های بدخیم کودکان مبتلا به ALL، نشان می دهد، میزان بیان ژن FASN در بیماران ALL مقاوم به داروهای شیمی درمانی نسبت به سایر بیماران، افزایش می یابد. علاوه بر این، عصاره زنجبیل سبب کاهش میزان بیان ژن FASN در سلول های بدخیم بیماران مبتلا به ALL می شود. مطالعات داکینگ مولکولی حاکی از گرایش بالای مشتق دارویی 6-شگول برای اتصال به دومین های تیوستراز و کتوسینتاز FASN و مهار فعالیت این آنزیم می باشد (10).
به نظر می رسد با افزایش فعالیت PPARγ، به دنبال اتصال 6-شگول (24) بیان ژن Insig1 در سلول سرطانی افزایش یابد (12). Insig1 با اتصال به SCAP مانع از انتقال کمپلکس SCAP-SREBP-1c به گلژی و پردازش SREBP-1c می شود. بنابراین بیان ژن های تحت کنترل این فاکتور رونویسی، از جمله FASN، کاهش می یابد (9 و 12). علی رغم عدم اثبات رابطه بین بیان ژن insig1 و FASN در این پژوهش، به نظر می رسد مطالعات تکمیلی در سطح اپی ژنتیکی و بررسی بیان ژن در سطح پروتئین بتواند در توجیه ارتباط بین این دو ژن و تفسیر مکانیسم اثر 6- شگول در سرطان خون کمک کننده باشد.
به طور کلی نتایج این مطالعه نشان داد 6-شگول دارای اثر سیتوتوکسیک بر رده های سلولی ALL می باشد. علاوه بر این مشخص شد این اثر می تواند ناشی از کاهش بیان ژن FASN باشد. FASN یکی از پروتئین های دخیل در رشد و تکثیر سلول های سرطانی است. علی رغم عدم اثبات فرضیه ی کاهش بیان ژن FASN متعاقب اقرایش بیان ژن insig1 در رده ی سلولی Nalm-6 متعاقب تیمار سلولی با 6-شگول، این پژوهش اولین مطالعه در خصوص اثبات اثر سیتوتوکسیک 6-شگول بر سلول های لوسمیک خون می باشد. باتوجه به عوارض جانبی داروهای شیمی درمانی و مهارکننده های غیرطبیعی FASN، این پژوهش با معرفی مشتق گیاهی 6- شگول به عنوان یک گیاه دارویی موثر و کم خطردر درمان ALL و پیشنهاد استفاده از آن به عنوان یک داروی مکمل در پروتکل های درمانی، می تواند گام موثری در جهت درمان سرطان خون تلقی شود.
سپاسگزاری
این مطالعه با استفاده از اعتبارات پژوهشی دانشگاه اصفهان (به شماره 14255/97) و مرکز تحقیقات گیاهان دارویی دانشگاه شاهد (به شماره 2517/15) انجام شده است.
| تعداد مشاهده مقاله | 1,941 |
| تعداد دریافت فایل اصل مقاله | 1,113 |
پژوهشهای سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران)