نوع مقاله : مقاله مروری
نویسندگان
1 دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، گروه بیوتکنولوژی، کرمان، ایران
2 دانشگاه کوثر بجنورد، دانشکده علوم پایه، گروه زیستشناسی سلولی و مولکولی، بجنورد، ایران
چکیده
پراکسیدازها یکی از کاربردیترین آنزیمها در حوزههای صنعتی، پزشکی و بیوتکنولوژی میباشند. در این مطالعه با استفاده از مقالات متعدد، در ارتباط با مزایا، معایب و کاربردهای پراکسیدازهای گیاهی و نانوزیمها )با خاصیت شبه پراکسیدازی(، اطلاعاتی جامع به صورت طبقهبندی آورده شده است. پراکسیدازها آنزیمهایی متعلق به گروه اکسیدوردوکتازها هستند که در تمامی موجودات زنده یافت میشوند و به کلاسهای مختلفی طبقهبندی میشوند که یکی از کاربردیترین آنها پراکسیدازهای گیاهی میباشند. با این وجود، عواملی از قبیل هزینه بالا تخلیص، پایداری کم و تجزیه توسط پروتئازها سبب محدودیت استفاده از پراکسیدازها میشود. امروزه، به منظور غلبه بر این مشکلات، مواد یا ترکیبات غیرپروتئینی که خاصیت شبه پراکسیدازی دارند مثل نانوزیمها، مورد توجه قرار گرفتهاند. جهت استفادههای صنعتی از پراکسیدازها، میتوان آنها را از منابع مختلف تهیه و خالصسازی نمود و همچنین میتوان فعالیت کاتالیتیکی و پایداری آنها را با استفاده از روشهای مختلف مهندسی محیط و مهندسی پروتئین بهینهسازی نمود، ولی بطور معمول این روشها هزینهبر و زمانبر میباشند. نانوزیمهای شبهپراکسیدازی را میتوان از مواد مختلف تهیه و با تغییر اندازه، شکل و ترکیب آنها با سایر مواد، فعالیت کاتالیتیکی و پایداری آنها را بهینهسازی نمود، که بطور معمول دستیابی به آنها نسبت به آنزیمها، راحتر، سریعتر و ارزانتر میباشد. در عین حال، مشکلاتی از قبیل ذخیرهسازی و تجزیه توسط پروتئازها که برای آنزیم-ها یک چالش میباشد در ارتباط با نانوزیمها مطرح نمیباشد. در مجموع بنظر میرسد که در کاربردهای صنعتی و پزشکی، نانوزیمها میتوانند جایگزین پراکسیدازها گیاهی شوند.
کلیدواژهها
موضوعات
عنوان مقاله [English]
Characterization and applications of plant peroxidase and nanoenzyme like-peroxidase
نویسندگان [English]
1 Department of Biotechnology, Institute of Science and High technology and Environmental Sciences, Graduate University of Advanced Technology, Kerman, Iran
2 Department of Molecular and Cell Biology, Faculty of Basic Sciences, Kosar University of Bojnord, Bojnord, Iran
چکیده [English]
Peroxidases are one of the most applicable enzyem in the fields of industry, medicine and biotechnology. In this study, comprehensive information on the advantages and disadvantages and also applications of plant peroxidases and nanozymes (with peroxidase-like properties), are provided in a categorized manner using of numerous articles. Peroxidase enzymes are belong to the oxidoreductases group which are found in all living organisms and are classified into different classes, one of the most applicable of which is plant peroxidases. However, applications of peroxidases limit by the some factors such as high cost of purification, low stability and degradation by proteases. Todays, in order to overcome these problems, non protein substances or compounds with peroxidase-like properties, such as nanozymes, have been considered. For industrial applications, peroxidases can be provided by purification from various sources, and also their catalytic activities and stabilities can be optimized using various methods such as environmental engineering and protein engineering, whilest these methods are costly and time consuming. Peroxidase-like nanozymes can be prepared from various materials which their catalytic activities and stabilities can be optimized throuth changing of their size, shape and combination with other materials that are usually easy, fast and cheape. At the same time, problems such as storage and degradation by proteases, which are a challenge for enzymes, are not associated with the nanozymes. Overall, it seems in industrial and medical applications, plant peroxidases can replace by nanozymes.
کلیدواژهها [English]
خصوصیات و کاربردهای پراکسیدازهای گیاهی و نانوزیمهای شبه پراکسیداز
فهیمه بهرام نژاد1 و علی ریاحی مدوار2*
1 ایران، کرمان، دانشگاه تحصیلات تکمیلی صنعتی و فناوری پیشرفته، پژوهشگاه علوم و تکنولوژی پیشرفته و علوم محیطی، گروه بیوتکنولوژی
2 ایران، بجنورد، دانشگاه کوثر بجنورد، دانشکده علوم پایه، گروه زیستشناسی سلولی و مولکولی
تاریخ دریافت: 20/04/1400 تاریخ پذیرش: 11/04/1401
چکیده
پراکسیدازها یکی از کاربردیترین آنزیمها در حوزههای صنعتی، پزشکی و بیوتکنولوژی میباشند. در این مطالعه با استفاده از مقالات متعدد، در ارتباط با مزایا، معایب و کاربردهای پراکسیدازهای گیاهی و نانوزیمها )با خاصیت شبه پراکسیدازی(، اطلاعاتی جامع به صورت طبقهبندی آورده شده است. پراکسیدازها آنزیمهایی متعلق به گروه اکسیدوردوکتازها هستند که در تمامی موجودات زنده یافت میشوند و به کلاسهای مختلفی طبقهبندی میشوند که یکی از کاربردیترین آنها پراکسیدازهای گیاهی میباشند. با این وجود، عواملی از قبیل هزینه بالا تخلیص، پایداری کم و تجزیه توسط پروتئازها سبب محدودیت استفاده از پراکسیدازها میشود. امروزه، بمنظور غلبه بر این مشکلات، مواد یا ترکیبات غیرپروتئینی که خاصیت شبه پراکسیدازی دارند مثل نانوزیمها، مورد توجه قرار گرفتهاند. جهت استفادههای صنعتی از پراکسیدازها، میتوان آنها را از منابع مختلف تهیه و خالصسازی نمود و همچنین میتوان فعالیت کاتالیتیکی و پایداری آنها را با استفاده از روشهای مختلف مهندسی محیط و مهندسی پروتئین بهینهسازی نمود، ولی بطور معمول این روشها هزینهبر و زمانبر میباشند. نانوزیمهای شبهپراکسیدازی را میتوان از مواد مختلف تهیه و با تغییر اندازه، شکل و ترکیب آنها با سایر مواد، فعالیت کاتالیتیکی و پایداری آنها را بهینهسازی نمود، که بطور معمول دستیابی به آنها نسبت به آنزیمها، راحتر، سریعتر و ارزانتر میباشد. در عین حال، مشکلاتی از قبیل ذخیرهسازی و تجزیه توسط پروتئازها که برای آنزیمها یک چالش میباشد در ارتباط با نانوزیمها مطرح نمیباشد. در مجموع بنظر میرسد که در کاربردهای صنعتی و پزشکی، نانوزیمها میتوانند جایگزین پراکسیدازها گیاهی شوند.
واژه های کلیدی: پراکسیداز، شبه پراکسیداز، نانوزیم.
* نویسنده مسئول، تلفن: 05832262863 ، پست الکترونیکی: Riahi.ali@gmail.com
مقدمه
پراکسیدازها آنزیمهایی متعلق به گروه اکسیدوردوکتازها (Oxidoreductase) میباشند [17]. این آنزیمها در تمامی سلولهای بدن موجودات زنده از قبیل باکتریها، قارچها، جلبکها، جانوران و گیاهان یافت میشوند [70]. پراکسیدازها دومین کلاس بزرگ آنزیمی میباشند که در فرایندهای بیوتکنولوژی کاربردهای فراوان دارند، و برای کاتالیز کردن واکنشهای مختلف اکسیداتیو، از هیدروژن پراکسید (H2O2) به عنوان شروع کننده واکنش و از سایر سوبستراها به عنوان دهنده الکترون استفاده میکنند [86].
برخی از سوبستراهای پراکسیدازها که بمنظور سنجش کمی و نیمه کمی مورد استفاده قرار میگیرند شامل او فنیلن دی آمین (O-phenylenediamine; OPD)، 2،2-آزینو بیس(3-اتیل بنزوتیازولین-6-سلفونیک اسید) (2,2'-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid; ABTS) و 3,3,5,5- تترا متیل بنزیدین (3,3,5,5-tetramethylbenzidine; TMB) میباشند. از بین این مواد TMB به دلیل غیرسمی بودن، متداولترین سوبسترا مورد سنجش میباشد. فرایند اکسیداسیون این سوبستراها یک واکنش اکسیداسیون غیرقابل برگشت بوده و محصول رنگی حاصل از آنها (رنگ زرد حاصل از OPD، رنگ آبی حاصل از TMB و رنگ سبز حاصل ABTS میباشد) یک رادیکال کاتیونی میباشد که به عنوان پروب آنالیتیکی برای حسگرهای کالریمتریک، برپایه عمل پراکسیدازها و شبه پراکسیدازها مورد استفاده قرار میگیرد [46].
طبقهبندی پراکسیدازها: پراکسیدازها براساس وجود یا عدم وجود هم در ساختارشان، به دو دسته پراکسیدازهای همدار (Heme peroxidase) و غیر همدار (Non-heme peroxidase) دستهبندی میشوند. برطبق پایگاه داده پراکسیدازها، 80 درصد از ژنهای آنها، پراکسیدازهای همدار را کد میکنند و پراکسیدازهای غیر همدار حدود 20 درصد از پراکسیدازها را به خود اختصاص میدهند [70]. پراکسیدازهای همدار به ابرخانوادههای سیکلواکسیژناز پراکسیداز (Peroxidase-cyclooxygenase)، کاتالاز پراکسیداز (Peroxidase catalase)، پراکسیداز پراکسیژناز ( Peroxidase-peroxygenase)، پراکسیداز کلرایت دیسموتاز (Peroxidase-chlorite dismutase) و پراکسیدازهای رنگزد ( Dye-decolorizing peroxidase) تقسیمبندی میشوند [20].
ابرخانواده سیکلواکسیژناز پراکسیداز (PCOXS) شامل پراکسیدازهای حیوانی میباشند که در ایمنی ذاتی و پاسخهای دفاعی نقش دارند. میلو پراکسیداز (Myeloperoxidase; MPO)، ائوزینوفیل پراکسیداز (Eosinophil peroxidase; EPO)، لاکتوپراکسیداز (Lacto peroxidase; LPO)، تیروئید پراکسیداز (Thyroid peroxidase; TPO) متعلق به این خانواده میباشند. در این ابرخانواده گروه پروستتیک هم به طور کوالانسی به آپوپروتئین متصل است [70،87].
ابرخانواده کاتالاز پراکسیداز (PCATS)، پراکسیدازهای همدار غیرحیوانی میباشند که بیشترین مطالعه بر روی این ابرخانواده صورت گرفته است. در ابتدا، این سوپرخانواده براساس منشا پراکسیدازی، به عنوان ابر خانواده پراکسیدازهای همدار گیاهی، قارچی و باکتریایی، نامگذاری شدند. بعدها، پراکسیدازهای این ابرخانواده به کلاس I، II و III تقسیمبندی شدند [70].
پراکسیدازها کلاسI شامل پراکسیدازها پروکاریوتی و یوکاریوتی میباشند که به منشا غیرحیوانی پراکسیدازها تعلق دارند. این پراکسیدازها فاقد پیوندهای دی سولفیدی، کلسیم و توالی سیگنال شبکه آندوپلاسمی در ساختارشان میباشند. این پراکسیدازها نقش اصلی در کاهش استرس اکسیداتیو شامل سمزدایی از گونههای فعال اکسیژن (Reactive oxygene species; ROS) مثل H2O2را بر عهده دارند. سیتوکروم c پراکسیداز ، آسکوربات پراکسیداز و کاتالاز پراکسیداز به این کلاس تعلق دارند [72،78،79]. ساختار سیتوکروم C پراکسیداز (CCP) از دو دومین تشکیل شده است که در هر دومین یک هم وجود دارد. هر دو هم موجود در این پروتئین در اتصال به H2O2 و احیا آن نقش دارند [101]. کاتالاز پراکسیداز(CP) عمدتاً در باکتریها مشاهده میشود. آنها آنزیمهای آنتی اکسیدانی، با دو عملکرد کاتالازی و پراکسیدازی میباشند که به علت ظرفیت کاتالیتیکی منحصر به فردی که دارند قادر به تجزیه H2O2 میباشند [70] .آسکوربات پراکسیداز(APX) نسبت به کاتالاز پراکسیدازها، میل ترکیبی بیشتری به H2O2 دارد و از آسکوربات به عنوان دهنده الکترون برای احیای H2O2 در اندامکهایی مانند کلروپلاست، سیتوزول، میتوکندری و پراکسیزوم استفاده میکند [4].
پراکسیدازهای کلاسII منحصراً شامل پراکسیدازهای قارچی هستند که نقش اصلی در تخریب بیولوژیکی، لیگنین را دارند. لیگنین پراکسیدازها، منگنز پراکسیدازها و پراکسیدازهای همه کاره (Versatile peroxidases) در این کلاس قرار میگیرند. برخلاف پراکسیدازهای کلاس I این پراکسیدازها دارای چهار پیوند دی سولفیدی حفاظت شده، سیگنال پپتیدی در انتهای N ترمینال و کلسیم در ساختار خود هستند که به دلیل داشتن سیگنال پپتیدی، پروتئینها ترشحی محسوب میشوند [70]. این آنزیمها در قارچهای پوسیدگی سفید (White rot fungal) وجود دارند که در تجزیه لیگنین چوب نقش ایفا میکنند [38]. از این آنزیمها میتوان در تخریب بیولوژیکی پسماندهای کشاورزی استفاده کرد [66]. منگنز پراکسیدازها قادر به اکسید کردن ساختارهای فنلی لیگنین هستند، در حالی که لیگنین پراکسیدازها ترکیبات غیرفنلی را هدف قرار میدهند و پراکسیدازهای همهکاره قادر به اکسید کردن هم ساختارهای فنلی و هم غیرفنلی میباشند [9،28].
پراکسیدازهای کلاس III گلیکوپروتئینیهایی هستند که بیشتردر گیاهان عالی یافت میشوند. این پراکسیدازها از یک پلیپپتید منحصر به فرد با 350 – 300 آمینواسید تشکیل شدهاند. با بررسی ساختارکریستالوگرافی آنها مشخص شده که این کلاس از پراکسیدازها از ده تا دوازده مارپیچ آلفا حفاظت شده با یک گروه پروستتیکی تعبیه شده در آن، چهار پیوند دی سولفیدی که به وسیله هشت رزیدو سیستئین به هم متصل شدهاند، دو رشته کوتاه بتا و کلسیم در جایگاه اتصال، تشکیل شدهاند. به دلیل وجود سیگنال پپتید در انتهای N، توانایی ترشح شدن به فضای خارج سلولی و هم واکوئل را دارند و به دلیل وجود سیگنال پپتید در انتهای C، میتوانند فقط به واکوئل ترشح شوند [54]. پراکسیداز تربکوهی (Horseradish peroxidase) یا HRP، پراکسیداز بادام زمینی، پراکسیداز سویا و پراکسیداز ازمک (Lepidium draba) یا LDP [30] در این کلاس قرار دارند.
گروه III پراکسیدازهای گیاهی به عنوان پراکسیدازهای کلاسیک مشهور میباشند و بیشتر از همه مورد مطالعه قرار گرفتهاند. پراکسیدازهای طبقهبندی شده در این کلاس، نقشهای حیاتی در چرخه زندگی گیاهان از جمله متابولیسم دیواره سلولی، ایجاد بافت چوب پنبهایی، چوب شدگی، متابولیسم اکسین، ترمیم زخم، رشد و رسیدن میوه، حذف گونههای فعال اکسیژن و ... دارند [70].
پراکسیداز تربکوهی (HRP) که به عنوان شاخص پراکسیدازهای کلاسیک شناخته میشوند دارای ایزوآنزیمهای متعددی میباشد. در سال 1958، Paul پنج فرم متفاوت از پراکسیداز را از ریشه ترب کوهی با استفاده از کروماتوگرافی تعویض یونی بر روی کربوکسی متیل سلولز جداسازی کرد و آنها را با حروف بزرگ A،B ،C ، D و E نامگذاری کرد.
اخیراً ژن یک آنزیم پراکسیداز از گیاه ازمک بومی ایران (از مناطق حومه شهر کرمان) شناسایی و کلون شده است. این گیاه، هم خانواده تربکوهی و از خانواده براسیکاسه میباشد. مطالعات بیوانفورماتیک نشان دهنده تشابه بالای این آنزیم با پراکسیداز معروف HRP میباشد. بهطوری که توالی پروتئینی آن بیش از 87 درصد با HRP همسانی دارد. با توجه به فعالیت کاتالیتیکی و بازده عملکرد این آنزیم، به عنوان یک همولوگ پراکسیداز HRP برای کاربردهای پزشکی و بیوتکنولوژی معرفی شده است [30]. در جدول 1 به خصوصیات سینیتیکی LDP در مقایسه با HRP پرداخته شده است. علاوه بر این، این گیاه علاوه بر منبع پراکسیداز، دارای ترکیباتی مثل گلوکوزینولاتها (Glucosinolate) میباشد که خاصیت ضد سرطانی دارند [20، 82].
ابرخانواده پراکسیژناز پراکسیداز (Peroxidase–peroxygenase superfamily) هنوز به طور کامل شناخته نشدهاند. مدتها است که کلروپراکسیداز، از Caldariomyces fumago تنها آنزیم شناخته شده این ابرخانواده میباشد [3]. ابرخانواده کلرایت دیسموتاز پراکسیداز (Peroxidase–chlorite dismutase superfamily) شامل دو خانواده کلرایت دیسموتاز و پروتئینهای شبه کلرایت دیسموتاز میباشد [3].
جدول 1- مقایسه خصوصیات سینتیکی LDP و HRP
منبع |
Km (M) [TMB] |
Km (M) [ H2O2] |
pH بهینه |
دما بهینه(°C) |
Tm (°C) |
پارامترها |
[29] |
52/0×10-4 |
84/0×10-3 |
6.5 |
25 |
63 |
LDP |
[91] |
15/0± 018/0 |
61/0± 042/0 |
7 |
37 |
50 |
HRP |
اخیراً ابرخانواده رنگزدا پراکسیداز (Dye-decolorizing peroxidase) در باکتریها و قارچها شناسایی شدهاند که قادر به تجزیه لیگنین میباشند [18].
کاربردهای پراکسیدازها: پراکسیدازها بر اساس تواناییشان در کاتالیز واکنشهای اکسایش–کاهش سوبستراهای فنلی و غیرفنلی، از اهمیت فراوانی در صنعت برخوردار میباشند. از مهمترین کاربردهای این آنزیمها در صنعت میتوان به قابلیت استفاده آنها در سیستمهای تشخیصی اسپکتروفتومتریک (شامل فلورسنت و لومینسنت) [6] ، حسگرهای زیستی [80]، حذف پراکسیدها از مواد غذایی و زبالههای صنعتی [7]، استفاده در اعمال سفیدکنندگی در صنایع پارچهبافی و کاغذسازی، در فرایندهای ازنیزاسیون (Ozonation) آب و هوا و نیز محصولات غذایی [68] ، سیستمهای گزارشگر [6] در تکنیکهای ایمنی سنجی (مثل الایزا، وسترن بلات) و ایمونوهیستوشیمی Immunohistochemistry [74] و همچنین درمان سرطان [32] اشاره نمود.
بطور کلی پراکسیدازها در حفظ محیط زیست، در بخش درمان و تشخیص و همچنین صنایع آرایشی کاربردهای گستردهای دارند. امروزه یکی از اصلیترین چالشهای محیط زیست که جهان با آن روبهرو است آلودگی آب، خاک و هوا میباشد که توسط مواد شیمیایی سمی صورت میگیرد [52]. پراکسیدازها با تبدیل آلایندهها به مواد دیگر، سمیت آنها را با انجام تغییراتی از جمله، از بین بردن فعالیت بیولوژیکی، کاهش دسترسی زیستی، حذف از محیط آبی کاهش میدهند [7].
رنگهای فنول و آزو (Azo) مواد آلودهکننده خطرناکی هستند که حاصل پسابهای صنایع نساجی، چرمسازی، غذایی، آرایشی و پتروشیمیایی میباشند و تهدید جدی برای محیطزیست محسوب میشوند [52]. گزارش شده که پراکسیدازهای سویا، کلروپراکسیدازها، لاکتوپراکسیدازها نقش موثری در تجزیه رنگهای آزو مثل تریپان بلو (Trypan blue) دارند [3]. لیگنین پراکسیدازها و منگنز پراکسیدازها در تجزیه رنگهایی مثل اورنج II که نوعی رنگ آزو میباشد نقش دارند [70]. گزارش شده است که در تجزیه فنول، HRP، لاکتوپراکسیداز، کلروپراکسیداز، پراکسیدازهای سویا [73،3] و LDP [73،1] نقش دارند. دسته دیگری از پراکسیدازها به نام پراکسیدازهای رنگزدا (DyPs) در تجزیه رنگهایی از جمله مالاشیت گرین (Malachite green)، متیلن ویوله (Methyl violet) و ریاکتیو بلک 5 (Reactive black 5) نقش دارند [20].
آفتکشها که در کنترل حشرات، قارچها، علفها نقش دارند یکی از آلایندهکنندههای محیط زیست محسوب میشوند و برای سلامتی انسان مشکلات حادی از جمله آسیبهای عصبی، سرطان، مشکلات تنفسی، اختلال در حافظه، و... ایجاد میکنند [7]. آفتکشهای بیفنیل پلی کلرهPCB)) (Polychlorinated Biphenyl) از ترکیبات نفت خام، زغال و کرئوزوت (Creosote) ساخته شدهاند که پراکسیدازهای بعضی از گونههای قارچی از جمله لیگنین پراکسیدازها و منگنز پراکسیدازها در حذف آنها نقش دارند [2].
داروها و متابولیتهای آنها که در آبهای سطحی، زیرمینی، و آشامیدنی یافت میشوند یکی دیگر از آلایندهکنندههای محیطزیست محسوب میشوند. به طور مثال، برخی از آنتیبیوتیکها در نمونههای آب فاضلاب بیمارستانها، فاضلاب شهری، فاضلاب حاصل از کارخانههای تولید آنتی بیوتیک و.. یافت میشود که بر سیستم غدد درون ریز موجودات حاضر در اکوسیستم تاثیر منفی میگذارند. پراکسیدازهایی مثل لیگنین و منگنز پراکسیدازها، در اکسیداسیون داروهایی از قبیل آنتیبیوتیکها، داروهای ضدالتهاب، ضد افسردگی و آرامبخش نقش دارند و قادر به پاکسازی این مواد از محیط زیست میباشند [2].
علاوه بر محیطزیست، پراکسیدازها در بخش تشخیصی و درمان کابردهای محتلفی دارند. پراکسیدازها یکی از اجزای اصلی تشکیل دهنده کیتهای تشخیصی اسیداوریک، کلسترول، سرطان مثانه، سرطان پروستات، دیابت ملیتیوس (Diabetes mellitus) و... میباشند. در بین پراکسیدازها، پراکسیداز ترب کوهی، بیشتر بمنظور اهداف تحلیلی مورد استفاده قرار گرفته است [70].HRP به دلیل اختصاصیت، انعطافپذیری در سنجش، پایداری، حساسیت تشخیص و در دسترس بودن در زمینه کاربردهای تحلیلی نسبت به سایر آنزیمها بیشتر استفاده شده است. تثبیت آنزیم پراکسیداز و استفاده از آن در ساخت بیوسنسورها به دلیل به صرفه بودن و در دسترس بودن، و همچنین در سنجش ایمونواسی و الایزا بسیار مورد توجه قرار گرفته است [21].
از طرف دیگر، فعال شدن پیش داروها در سلولهای سرطانی به واسطه آنزیمها یک روش درمانی جذاب برای درمان سرطان میباشد. پراکسیداز و پیش داروی ایندول استیک اسید (Indole-3-acetic acid) به عنوان یک ترکیب نویدبخش (پیش دارو – آنزیم) جهت درمان سرطان مورد تحقیق و بررسی قرار گرفته است [57].
علاوه بر موارد اشاره شده، پراکسیدازها در صنایع آرایشی نیز کاربرد دارند به طور سنتی رنگ مو از طریق پلیمریزاسیون اکسیداتیو مواد اولیه رنگهایی، مثل فنول، آمینوفنول و جفت کنندهها ستنز میشود. برای این فرایند از پراکسید هیدروژن 3 درصد جهت آغاز پلیمریزاسیون استفاده میشود، اما به مرور زمان این غلظت از پراکسید هیدروژن باعث از بین رفتن رنگدانه ملانین مو، و آسیب به مو میشود که برای رسیدن به رنگآمیزی و فرایند اکسیداسیون ملایمتر میتوان از آنزیمهایی مانند پراکسیدازها و اکسیدازها به عنوان گزینههای بهتر در این زمینه استفاده نمود [70].
شبه پراکسیدازها: همانطور که گفته شد پراکسیداز ها از جمله HRP به دلیل کارایی و اختصاصیت بالا، دارای کاربردهای فراوانی در حوزه صنعت، پزشکی، بیوسنسورها و غیره هستند. اما متاسفانه دارای نواقص ذاتی متعددی نیز میباشند. از جمله این موارد میتوان به هزینه بالا آماده سازی، تخلیص و ذخیره کردن و دناتوره شدن در شرایط نامناسب دمایی و pH، تجزیه توسط پروتئازها و پایداری کم اشاره نمود. این نواقص ذاتی ذکر شده به طور جدی بر روی کاربرد طبیعی آنزیمها اثر میگذارند و برای خاتمه دادن به این نواقص استفاده از کمپلکسهای شبه پراکسیدازی از جمله همین (Hemin)، هماتین (Hematin)، پورفیرین(Porphyrin) و نانوزیمها (Nanozymes) گسترش یافته است [59،44].
نانوزیمها: نانوزیمها نوعی از مواد در مقیاس نانو (nm 100- 1)، با خاصیت کاتالیتیکی آنزیمی هستند و فعالیت آنزیم را تقلید میکنند که با دستکاری مواردی مثل اندازه، شکل، مورفولوژی و اصلاح سطح ترکیب میتوان فعالیت کاتالیتیکی نانوزیمها را تنظیم نمود. چون فعالیت کاتالیزوری معمولاً در سطح نانوزیمها صورت میگیرد تغییرات پوشش سطح و اندازه نانوزیمها از اهمیت بیشتری بمنظور تغییر فعالیت کاتالیتیکی نانوزیم برخوردار میباشد. نانوزیمها، نویدبخش جایگزین آنزیمهای طبیعی در زمینههای مختلف از جمله در زمینههای پزشکی، صنعتی و زیستی میباشند [44،61،102]. ثابت شده است که مورفولوژی سطح نانوذرات نقش مهمی در تنظیم فعالیت کاتالیزوری آنها دارد، بنابراین تنظیم فعالیت شبه آنزیمی نانوزیمهای فلزی میتواند با تنظیم وجوه سطح، کنترل شود [34]. قبل از استفاده از نانوزیمها به عنوان آنزیمهای مصنوعی، مواد مختلفی از جمله سیکلودکسترینها (Cyclodextrins)، پورفیرینها، فولرنها (Fullerenes)، دندریمرها (Dendrimers) و... به عنوان آنزیمهای مصنوعی مورد استفاده قرار گرفتند تا این که در سال 2007 نانوذرات Fe3O4 با خاصیت پراکسیدازی کشف شدند. از آن زمان تاکنون مطالعات بسیاری در مورد آنزیمهای مصنوعی مبتنی بر نانو مواد، به نام نانوزیم ها انجام شده است [44]. نانوزیمها در چند گروه شامل نانوزیمهای فلزی (مثل Fe، Ag، Au،Cu و....)، نانوزیم بر پایه اکسیدهای فلزی (مثل ZnO،CuO ، NiO، CeO2 و...) و نانوزیم های بر پایه ساختارهای کربنی (مثل GO، CNT، C60) مورد بررسی و مطالعه قرار گرفتهاند [5].
بر اساس مطالعات انجام شده، مزایا و معایب نانوزیمها در مقایسه با آنزیم مشهور HRP جمعبندی و در جدول 2 آورده شده است. همچنین کاربردهای مربوط به نانوزیمها در صنایع مختلف، در جدول 4 نشان داده است.
جدول 2- مقایسه مزایا و معایب آنزیمهای پراکسیداز (HRP) نسبت به نانوزیمها با خاصیت شبه پراکسیدازی.
|
HRP و سایر پراکسیدازها |
رفرنس |
نانوزیمها با فعالیت شبه پراکسیدازی |
منبع |
مزایا |
- خاصیت کاتالیتیکی بالا، توانایی تقویت سیگنالهای ضعیف از طریق واکنشهای آبشاری |
[26] |
- پایداری بالا در برابر تغییرات pH و دما، هزینه کم، تمایل بالا به سوبسترا، قابلیت تنظیم بالا، دارای کاربردهای چند منظوره، سازگاری با مکانیسمهای میکائیلیس منتن و پینگ پونگ |
[5] |
معایب
|
- به شرایط محیطی حساس هستند و به راحتی با تغییر دما و pH دناتوره میشوند، توسط آنزیمهای پروتئاز هضم می شوند، آماده سازی و تخلیص آنها پیچیده و هزینهبر میباشد. |
[46] |
- فاقد جایگاه فعال برای سوبسترا میباشند، دارای برهمکنشهای غیر منتظره هستند، فعالیت کاتالیتیکی اندکی دارند.
|
[5] |
جدول 3- عوامل تاثیرگذار بر فعالیت شبه پراکسیدازی نانوزیمها فلزی و اکسید فلزی.
عوامل تاثیر گذار بر فعالیت شبه پراکسیدازی نانوزیمها |
نوع نانوزیم |
نانو ماده |
توضیحات |
رفرنس |
شکل |
اکسید فلزی |
نانوذره سریم اکساید |
در بین چهار شکل سنتز شده از نانوذره سریم اکساید ( کروی، هشت ضلعی، بامبو، شش وجهی)، شکل بامبو این نانوذره خاصیت شبه پراکسیدازی بهتری از خود نشان میدهد. |
[102] |
اکسید فلزی |
نانوذره اکسید آهن |
نانوذره اکسید آهن هشت ضلعی، از خاصیت شبه پراکسیدازی بیشتری نسبت به نانوذره اکسید آهن کروی، برخوردار میباشد. |
[93] |
|
pH و دما |
فلزی |
نانوذره طلا |
pH اسیدی باعث افزایش فعالیت شبه پراکسیدازی نانوزیم طلا میشود. |
[77] |
فلزی
|
نانوگل پلاتینیوم |
نانوگل پلاتینیوم در pH اسیدی، فعالیت شبه پراکسیدازی بالایی از خود نشان میدهد. همچنین در دماهای بالاتر از 60 درجه سانتی گراد بیش از 80 درصد فعالیت شبه پراکسیدازی آن حفظ میشود. |
[97] |
|
اکسید فلزی
|
نانوذره اکسید آهن
|
فعالیت کاتالیتیکی نانوذره اکسید آهن وابسته به pH میباشد. به طوری که در pH سه این نانوزیم خاصیت شبه پراکسیدازی و در pHخنثی خاصیت کاتالازی دارد. |
[93] |
|
تشکیل کمپلکس یا هیبرید |
فلزی |
نانو ذره پالادیوم
|
هیبرید نانوذره پالادیوم بهمراه نانوذره طلا، نقره، پلاتینیوم باعث افزایش پایداری نانوذره پالادیوم میشود. |
[76] |
فلزی
|
نانوکامپوزیت پلاتینیوم |
نانوکامپوزیت Pt48Pd52-Fe3O4 فعالیت شبه پراکسیدازی ویژهایی نسبت به نانومواد PtPd و Fe3O4 از خود نشان میدهد. |
[58] |
|
فلزی |
نانوذره طلا |
در اثر هیبرید شدن نانوذره و نانوکلاستر طلا با گرافن اکساید خاصیت شبه پراکسیدازی این نانوذره افزایش مییابد. |
[81،76] |
|
پوشش و اصلاح سطح |
فلزی
|
نانوکلاستر طلا |
افزایش فعالیت شبه پراکسیداز نانوکلاستر طلا در حضور آلبومین سرم گاوی مشاهده شد. |
[14] |
فلزی |
نانوذره طلا
|
پورین، ATP، هپارین، یون مس از جمله مواردی هستند که با اصلاح پوشش سطح نانوزیم طلا باعث افزایش فعالیت شبه پراکسیدازی آن میشوند. با اضافه شدن کازئین به سطح این نانوذره فعالیت شبه پراکسیدازی کاهش یافت. |
[41،62،94،75]
[65] |
|
فلزی
|
نانوذره نقره
|
نانوذرات نقره با کیتوزان Chitosan)) پایدار میشوند و این امر سبب افزایش فعالیت شبه پراکسیدازی آنها میشود. نقاط کربنی (Carbon dots) در پایداری نانوذرات نقره نقش دارند. |
[36]
[47] |
|
|
فلزی |
نانوذره پالادیوم
|
فعالیت شبه پراکسیدازی نانوذره پالادیوم در حضور هیستدین افزایش مییابد. |
[105] |
فلزی
|
نانوذره پلاتینیوم |
آپوفریتین بهمراه نانوذره پلاتینیوم در پایداری این نانوذره نقش دارد. |
[5] |
|
فلزی |
نانوذره مس
|
نانوذره مس توسط هومیک اسید پایدار میشود که در حفظ خاصیت شبه پراکسیدازی این نانوذره برای مدت طولانی نقش دارد. |
[61] |
|
فلزی |
نانوکلاستر مس |
پپسین و آلبومین سرم گاوی، از عواملی هستند که در افزایش فعالیت شبه پراکسیدازی نانوکلاستر مس نقش دارند. |
[64] |
|
اکسید فلزی |
نانوذره اکسید آهن |
آمینواسید هیستیدین باعث بیست برابر شدن خاصیت شبه پراکسیدازی نانوذره اکسید آهن میشود. |
[16] |
مکانیسم پراکسیدازی نانوذرات فلزی بدین صورت است که فعالیت کاتالیزوری اکسیداتیو مشابه به پراکسیدازها را از خود نشان میدهند. در این استراتژی یونهای فلزی در معرض سطح، به عنوان حدواسط محل اتصال رادیکالهای هیدروکسیل عمل میکنند و باعث اکسید شدن سوبسترا میشوند [82]. همانطور که گفته شد عواملی از قبیل شکل، اصلاح پوشش و سطح نانوذره، دما، pH و... بر روی فعالیت شبه پراکسیدازی نانوزیمها اثرگذار هستند، در جدول 3 به عوامل تاثیرگذار بر فعالیت شبه پراکسیدازی نانوزیمهای فلزی و اکسیدهای فلزی پرداخته شده است.
نانوزیمهای بر پایه کربن: نانوزیمهای بر پایه کربن شامل ترکیبات بر پایه گرافن اکساید (GO) و نانولولههای کربنی (Carbon nanotube; CNT) میباشند. برای اولین بار، خاصیت شبه پراکسیدازی گرافن اکساید توسط Qu و همکارانش در سال 2010 کشف شد [22]. تلفیق گرافن اکساید با Fe3O4 (GO-Fe3O4) به شکل نانوکامپوزیت اخیراً به عنوان یکی از داغترین مسائل برای محققان تبدیل شده است. ثابت شده است که فعالیت شبه پراکسیدازی این دو با هم، افزایش مییابد و یا یک عملکرد جدیدی را از خود نشان میدهند که برای هر کدام از این دو به تنهایی چنین عملکردی را نمیتوان مشاهده کرد [96]. یکی دیگر از نانوکامپوزیتهایی که اخیراً بر پایه نانوکامپوزیت گرافن اکساید سنتز شده، نانوذره نیکل سولفید است که بر سطح مونت مریلینت/ گرافن اکساید (Montmorillonite/graphene oxide) سنتز شده است NiS/MMT/GO)).
جدول 4- کاربرد نانوزیمها
موارد استفاده |
نانوزیم |
ساختار |
تشخیص براساس |
توضیحات |
منبع |
محیط زیست
|
طلا |
نانوذره |
کموسنسور کالریمتریک |
شناسایی آفت کش ارگانوفسفر (Organophosphorus) مثل دیمتیوات (Dimethoate) که برای دفع حشرات در کشاورزی مورد استفاده قرار می گیرد. |
[41] |
Co-g-C3N |
نانوکامپوزیت |
کالریمتریک |
تصفیه فاضلاب ها |
[67] |
|
درمانی و تشخیصی |
طلا |
نانوذره |
کالریمتریک |
شناسایی اوره، اوره آز و بازدارنده اوره آز |
[19] |
پالادیوم |
نانوذره |
کالریمتریک |
شناسایی سارکوزین ادرار برای تشخیص سرطان پروستات |
[55]
|
|
پلاتین
|
نانوگل
|
- |
شناسایی بیومارکر DHEA، DHEAs سرطان غده فوق کلیوی |
[97] |
|
طلا |
نانوکلاستر |
کالریمتریک |
شناسایی هپارین و هپاریناز |
[41] |
|
CeO2 |
نانوذره |
- |
کاهش ROS و التهاب |
[39] |
|
CeO2 |
نانوذره |
- |
کاهش H2O2 و پروکسی نیتریت (Peroxynitrite) در بیماری آلزایمر |
[24] |
|
ایمونواسی
|
پلاتین بهمراه نانوذره متخلخل |
نانوذره |
کالریمتریک |
شناسایی DNA |
[92] |
Au @ Ag |
نانومیله |
لومینسانس الکتروشیمیایی |
شناسایی آنتی ژن کارسینوامبریونیک (Carcinoembryonic antigen) |
[106] |
|
Au @ Pd |
نانومیله |
لومینسانس الکتروشیمیایی |
شناسایی آنتی ژن کارسینوامبریونیک |
[107] |
|
ضد باکتریایی و ویروسی
|
پالادیوم
Ag-@TiO2 SAN |
نانوکریستال
نانوکامپوزیت |
-
- |
خاصیت ضد باکتریایی برعلیه باکتریهای گرم مثبت و گرم منفی خاصیت ضدویروسی بر علیه کووید 19 |
[45]
[88] |
جدول 5- مقایسه خصوصیات فیزیکوشیمایی و سینتیکی شبه پراکسیدازها
شبه پراکسیدازها
|
pH بهینه
|
دما بهینه (ºC) |
حفظ فعالیت در محدوده pH |
حفظ فعالیت در محدوده دما (ºC) |
غلظت بهینه H2O2
|
منبع
|
نانوکلاستر طلا همراه با آپوفریتین |
4 |
45 |
12-2 |
4-85 |
- |
[49] |
نانوگل پلاتینیوم |
4 |
40 |
2-10 |
30-100 |
- |
[97] |
نانوذره مس |
3 |
35 |
- |
- |
10-7 × 32/1 M |
[90] |
نانوکلاستر مس بهمراه پپسین |
7 |
35 |
5-9 |
27-50 |
- |
[64] |
نانوذره اکسید مس |
4 |
40 |
3-12 |
4-90 |
M5/1 |
[15] |
نانو کامپوزیت PDI-CuO |
4 |
55 |
- |
20-65 |
- |
[11] |
نانو کامپوزیت Co3o4/rGO |
3.5 |
30 |
5/11 – 5/1 |
20-60 |
Mol10-1×1 |
[95] |
نانوذره گرافن اکساید |
4 |
35 |
- |
- |
mM 150 |
[83] |
نانوکامپوزیت GO-Fe3O4 |
4 |
40 |
- |
- |
mM 50 |
[23] |
)NiS/MMT/GO)نانوکامپوزیت |
4 |
55 |
2-8 |
30-70 |
- |
[13] |
نانولولههای کربنی تک دیواره
|
4 |
40 |
1-12 |
20-60 |
mM 125 |
[84] |
فیسین
|
4 |
35 |
3-14 |
0-70 |
mM 80/0 |
[91] |
جدول 6- انواع نانوزیمهایی که در تشخیص گلوکز کاربرد دارند.
نانوزیم |
نوع نانوزیم |
سوبسترا |
حد تشخیص برحسب میکرومتر |
منبع |
|
نانوذرات طلا با بار مثبت |
فلزی
|
TMB |
4 |
[53] |
|
آپوفریتین همراه با نانوکلاستر طلا |
فلزی |
TMB |
- |
[90] |
|
نانوذرات مس |
فلزی |
TMB |
686/0 |
[90] |
|
نانوکلاستر مس |
فلزی |
TMB |
100 |
[42] |
|
نانوکلاستر پلاتین |
فلزی |
ABTS |
28/0 |
[51] |
|
نانومیله Au@Ag |
دو فلزی |
TMB |
25 |
[37] |
|
نانوکمربند Au/Ag |
دو فلزی |
TMB
|
85 |
[8] |
|
نانوذرات Co3O4 |
اکسید فلزی |
TMB |
5 |
[48] |
|
نانوذرات اکسید مسCuO |
اکسید فلزی |
TMB |
1 |
[40] |
|
نانوذرات CeO2 |
اکسید فلزی |
TMB |
3 |
[50] |
|
نانوفیبرVo2 |
اکسید فلزی |
TMB |
9 |
[85] |
|
C60-carboxyfullerene |
کربنی |
TMB |
5/0 |
[56] |
|
گرافن اکساید اصلاح شده با کربوکسیل |
کربنی |
TMB |
1 |
[83] |
|
نانوذرات سولفید مس |
سولفید فلزی |
TMB |
12/0 |
[25] |
این نانوکامپوزیت برای شناسایی گلوتاتیون به روش کالریمتریک استفاده شده است. گلوتاتیون در عملکردهای زیستی نقش دارد و به دو فرم وجود دارد که در بیماریهایی از قبیل آلزایمر، ویروس نقص ایمنی بدن (HIV) و افزایش سن، میزان آن افزایش مییابد [13]. نانوذرات دو فلزی آهن و پلاتین، که بر روی صفحه گرافن اکساید پراکنده شدهاند FePt/GO)) دارای خاصیت شبه پراکسیدازی میباشند. FePt/GO دارای مزایایی از قبیل هزینه کم، تهیه ساده و حساسیت بالا میباشد که کاندید مناسبی برای فعالیتهای شبه پراکسیدازی و در مواردی از قبیل آنالیزهای بیوشیمیایی، تشخیصهای پزشکی و کشاورزی کاربرد دارد [12].
خاصیت شبه پراکسیدازی نانولولههای کربنی تک دیواره (Single- walled carbon nanotubes; SWNTs)، اولین بار در سال 2010 مورد بررسی قرار گرفت. مشخص شده است که عواملی از قبیل، pH، دما و غلظت H2O2 بر فعالیت شبه پراکسیدازی این نانولوله کربن تاثیر میگذارند [96]. از نانوکامپوزیت نانولولههای کربنی حامل Fe2O3 (Fe2O3/CNT) بمنظور شناسایی دوپامین به روش کالریمتریک استفاده شده است [99]. همچنین از نانوکامپوزیت ذرات مغناطیسی بر پایه نانولوله کربنی با چندین دیواره (Multi-walled carbon nanotube; MWNTsMWNTs) میباشد. که بمنظور حذف فنول از فاضلاب مورد استفاده قرار گرفت [104]. C60 – کربوکسی فلورنها (C60-carboxy fullerene) دارای خاصیت شبه پراکسیدازی میباشند که میل ترکیبی بیشتری نسبت به HRPبه TMB دارند و در طراحی بیوسنسور بمنظور تشخیص گلوکز سرم خون مورد استفاده قرار گرفته است [69]. نوع نانوزیم و برخی ویژگیها و کاربردهای نانوزیمها بر پایه کربن در جدول 7 آورده شده است.
علاوه بر مواردی که تا کنون اشاره گردید، برخی مواد که خاصیت شبه پراکسیدازی دارند شامل چارچوب آلی-فلزی(Metal-organic frameworks; MOF)، سولفیدهای فلزی (سولفید روی، سولفید مس و نانومیلههای سولفید مس)، برخی یونها، نانوذرات پروشین بلو PB NPs) ) و یک سولفوهیدریل پروتئاز بنام فیسین میباشد.
MOFها ساختارهایی با منفذهای متعدد میباشند که به عنوان نانوزیم به طور گسترده در زیست پزشکی کاربرد دارند. آنها از مزایای متعددی همچون قیمت پایین، ساختار پایدار، ذخیره راحت و فعالیت قابل تنظیم، نسبت به آنزیم طبیعی برخوردار هستند. این چارچوبها از یک یون یا کلاستر فلزی (مثل Cu و Fe) بهمراه یک لیگاند آلی (مثل ترفتالیک اسید، 1،3،5 اسید بنزن تری کربوکسیلیک ( Terephthalic acid, 1,3,5-benzenetricarboxylic acid)) با خاصیت شبه پراکسیدازی قابل تنظیم، ساخته میشوند [89].
نانوذرات سولفید روی (ZnS) دارای خاصیت شبه پراکسیدازی میباشند و از آن میتوان برای تشخیص گلوکز استفاده کرد [103]. پورفیرین بهمراه نانوذرات ZnS باعث افزایش خاصیت شبه پراکسیدازی میشود بطوریکه در مقایسه با نانوذرات ZnS از خاصیت شبه پراکسیدازی بالاتری برخوردار میباشد، در واقع Porphyrin-ZnS دارای میل ترکیبی بیشتری به TMB نسبت به نانوذره ZnS خالص و HRP است [60]. نانوذرات سولفید مس (CuS) که به روش سبز تهیه شدند، دارای فعالیت شبه پراکسیدازی میباشند و نسبت به HRP دارای چندین مزیت از جمله فعالیت کاتالیتیکی بالا، پایداری بالاتر و دارای قابلیت پراکندگی میباشند [25]. نانومیلههای سولفید مس ( Copper sulfide nanorods) نیز دارای خاصیت شبه پراکسیدازی هستند و دارای مزایایی از جمله مقرون به صرفه، تهیه آسان و پایداری بالا نسبت به آنزیم طبیعی پراکسیداز میباشند [35].
ثابت شده است که یون فریک (+Fe3) نیز دارای خاصیت شبه پراکسیدازی میباشد و حتی خاصیت شبه پراکسیدازی آن از Fe3O4 بیشتر میباشد.
جدول 7- انواع نانوزیمها بر پایه کربن و مقایسه برخی ویژگیها و کاربردها.
نانوزیمهای بر پایه کربن |
نوع نانوزیم |
ویژگیها یا کاربردها |
منبع
|
گرافن اکساید |
نانوذره گرافن اکساید
|
گرافن اکساید اصلاح شده با گروه کربوکسیل (GO-COOH)، فعالیت کاتالیتیکی بالاتری نسبت به HRP دارد. |
[22، 47] |
نانوکامپوزیت گرافن اکساید |
نانوکامپوزیت GO-Fe3O4جهت شناسایی گلوکز ادرار، نانوکامپوزیت گرافن اکساید سنتز شده، نانوکامپوزیت NiS/MMT/GO جهت شناسایی گلوتاتیون. |
[13، 96] |
|
نانوصفحه گرافن اکساید |
FePt/GO دارای مزایایی از قبیل هزینه کم، تهیه ساده و حساسیت بالا میباشد. |
[12] |
|
نانولولههای کربنی |
نانولولههای کربنی تک دیوارهSWNTs))
|
شناسایی پلی مورفیسم تک نوکلئوتیدی ( Single nucleotide polymorphism; SNP). |
[96] |
نانوکامپوزیت CNT |
نانوکامپوزیت Fe2O3/CNT بمنظور شناسایی دوپامین، نانوکامپوزیت ذرات مغناطیسی بر پایه نانولوله کربنی با چندین دیواره بمنظور حذف فنول |
[99، 104] |
|
C60 – کربوکسی فلورنها |
تشخیص گلوکز سرم خون |
[69] |
از خاصیت شبه پراکسیدازی این یون میتوان در شناسایی سیستئین به روش کالریمتریک اشاره کرد، همچنین در شناسایی تیوگلیکولیک اسید (Thioglycolic acid) به روش کالریمتریک نقش دارد [43].
پروشین بلو یا Fe4[Fe(CN)6]3 رنگدانههایی حاوی آهن میباشند، این نانوساختار دارای رفتار شبه پراکسیدازی میباشد و در احیا H2O2 نقش دارد [27]. اخیراً از PB NPs بمنظور افزایش فعالیت شبه پراکسیدازی نانو ذرات مغناطیسی γ-Fe2O3 استفاده شده است و این نانوذره با تغییر فریتین باعث افزایش خاصیت شبه پراکسیدازی آن میشود که در تشخیصهای زیستی کاربرد دارد [27]. از این نانوذره همچنین جهت شناسایی گلوکز و H2O2 استفاده شده است [10]. فیسین یک سولفوهیدریل پروتئاز میباشد که از شیره درختان انجیر جداسازی میشود و دارای فعالیت شبه پراکسیدازی میباشد. جایگاه فعال خاصیت شبه پراکسیدازی فیسین با جایگاههای فعال پروتئازی آن متفاوت میباشد. فعالیت شبه پراکسیدازی فیسین به عوامل مختلفی از جمله pH، غلظت H2O2، دما و زمان انکوباسیون وابسته است، از خاصیت شبه پراکسیدازی فیسین در شناسایی گلوکز، اوریک اسید و سیستئین استفاده شده است [45،69،71،100].
همانطور که در متن اشاره گردید، نانوآنزیمها با فرمهای مختلف و ویژگیهای متنوع از طیف وسیعی از مواد و ترکیبات قابل تولید میباشند. مشابه آنچه که در ارتباط با پراکسیدازهای گیاهی ثابت شده است، نانوزیمها با خاصیت شبه پراکسیدازی کابردهای بسیار متنوعی دارند. با توجه به تهیه سریعتر و ارزانتر و متنوعتر نانوزیمها شبه پراکسیدازی، آنها میتوانند در برخی کاربردهای صنعتی و پزشکی، جایگزین پراکسیدازها گیاهی شوند.
100- Yang Y, Shen D, Long Y, Xie Z, Zheng H. Intrinsic peroxidase-like activity of ficin. Scientific reports. 2017;7(1):1-8.
101- Zapata C, Paillavil B, Chávez R, Álamos P, Levicán G. Cytochrome c peroxidase (CcP) is a molecular determinant of the oxidative stress response in the extreme acidophilic Leptospirillum sp. CF-1. FEMS microbiology ecology. 2017;93(3).
102- Zhang B, Huyan Y, Wang J, Wang W, Zhang Q, Zhang H. Synthesis of CeO2 nanoparticles with different morphologies and their properties as peroxidase mimic. Journal of the American Ceramic Society. 2019;102(4):2218-27.
103- Zhang Q, Kang Y, Sun H, Liang Y, Su Z, Dan J, et al. Supplementary Materials: Natural Products Self-Assembled Nanozyme for Cascade Detection of Glucose and Bacterial Viability in Food.
104- Zhang S, Hu Y. Nanozymes in Environmental Protection. Nanozymes for Environmental Engineering: Springer; 2021. p. 213-41.
105- Zhang W, Niu X, Meng S, Li X, He Y, Pan J, et al. Histidine-mediated tunable peroxidase-like activity of nanosized Pd for photometric sensing of Ag+. Sensors and Actuators B: Chemical. 2018;273:400-7.
106- Zhang Y, Lu F, Yan Z, Wu D, Ma H, Du B, et al. Electrochemiluminescence immunosensing strategy based on the use of Au@ Ag nanorods as a peroxidase mimic and NH4 CoPO4 as a supercapacitive supporter: application to the determination of carcinoembryonic antigen. Microchimica Acta. 2015;182(7-8):1421-9.
107- Zhang Y, Pang X, Wu D, Ma H, Yan Z, Zhang J, et al. A robust electrochemiluminescence immunoassay for carcinoembryonic antigen detection based on a microtiter plate as a bridge and Au@ Pd nanorods as a peroxidase mimic. Analyst. 2016;141(1):337-45.