انجمن زیست شناسی ایران مجله پژوهش‌های سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران)(علمی) 2383-2738 26 4 2014 02 20 Cloning and functional analysis of inducible promoter Rd29A in transgenic tobacco plants همسانه‌سازی و ارزیابی فعالیت پیشبر القایی Rd29A در گیاهان تراریخت توتون 480 490 279 2647 FA Journal Article 2012 01 23 Stress inducible promoters are key elements in development of transgenic abiotic resistant plants. Abiotic stress inducible promoter <em>Rd29A</em> was cloned by Polymerase chain reaction (PCR) from <em>Arabidopsis thaliana</em> genomic DNA. pBI-RD-GUS binary vector constructed by replacing <em>CaMV35S</em> promoter of vector pBI121 by <em>Rd29A</em>. The new recombinant vector pBI-RD-GUS as well as pBI121 was transferred to tobacco by <em>Agrobacterium tumefaciencs</em> system. PCR and GUS histochemical assay of transgenic tobacco plants confirmed transformation events. Stress induciblity of the promoters studied by histochemical GUS assay of transgenic leaves under stress conditions. The assay showed that promoter <em>Rd29A</em>, in contrast of <em>CaMV35S</em>, induced by dehydration, NaCl and ABA. <em>Rd29A</em> induction by ABA confirmed the signaling role of it in stress signal transduction pathways. Therefore, if abiotic stress resistance genes are driven by <em>rd29</em>A in the transformed plant, the disadvantage, like small figure, low growth rate etc, to transgenic plant due to the over-expression of exogenous genes can be greatly reduced. پیشبر <em>Rd29A</em> به وسیله واکنش زنجیری پلیمراز (PCR) و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی از گیاه <em>Arabidopsis</em> <em>thaliana</em> همسانه­سازی شد. ناقل دوگانه بیانی pBI-RD-GUS با اتصال توالی <em>RD29A</em> به ژن <em>gus</em> ساخته شد. سازه اخیر به همراه pBI121 با استفاده از <em>Agrobacterium tumefaciens</em> برای تراریختی گیاه توتون مورد استفاده قرار گرفت. ارزیابیهای مولکولی گیاهان تراریخته توتون حضور و فعالیت ژن <em>gus</em> تحت پیشبرهای <em>Rd29A</em> و <em>CamV35S</em> را تأیید نمود. تأثیر تیمارهای مختلف تنشی مانند شوری (NaCl)، خشکی (PEG) و آبسزیک اسید (ABA) نشان داد که این پیشبر <em>Rd29A</em> برخلاف پیشبر همیشه فعال <em>CaMV35S</em> تنها تحت اثر تنشهای غیرزیستی القاء می­شود. القاء پذیری پیشبر <em>Rd29A</em> توسط ABA نشان دهنده نقش سیگنالی این ماده در مسیر ترارسانی علامتی تنشهای غیرزیستی می­باشد. با توجه به اینکه بیان دائمی ژنهای مقاومت به تنش تحت کنترل پیشبر <em>CaMV35S</em> در بسیاری از موارد مانع رشد طبیعی گیاهان تراریخته می­شود، بنابراین پیشبر القایی <em>Rd29A</em> می­تواند جایگزینی مناسب برای تراریختی گیاهان متحمل به تنش باشد.<span style="white-space: pre;"> </span> https://cell.ijbio.ir/article_279_d395771085aab05244a4fb8fd91bf4ee.pdf