%0 Journal Article %T طراحی و تولید کاوشگر بیولومینسانی جدید برای تشخیص مولکولی استافیلوکوکوس اورئوس %J پژوهش‌های سلولی و مولکولی (مجله زیست شناسی ایران) %I انجمن زیست شناسی ایران %Z 2383-2738 %A مزیدی, یاسمن %A امام زاده, رحمان %A نظری, محبوبه %A جعفری, سیده شهربانو %D 2023 %\ 01/18/2023 %V %N %P - %! طراحی و تولید کاوشگر بیولومینسانی جدید برای تشخیص مولکولی استافیلوکوکوس اورئوس %K افی بادی ZpA963 %K استافیلوکوکوس اورئوس %K رنیلا لوسیفراز (Rluc ) %K لومینسانس %R %X استافیلوکوکوس اورئوس از عوامل بیماری زای مهم در انسان و حیوان محسوب می‌شود. این باکتری به دلیل توانایی بسیار زیادش در کسب مقاومت نسبت به انواع آنتی‌بیوتیک‌ها و در نهایت ایجاد بیماری‌های شدید حائز اهمیت می باشد. شناسایی عفونت های حاد ناشی از این باکتری با استفاده از روش‌های متداولی مانند کشت، کاری هزینه‌بر و زمان‌بر می‌باشد. در این مطالعه طرحی و توسعه‌ی کاوشگر پروتئینی اختصاصی و سریع انجام است که وجود باکتری استافیلوکوکوس اورئوس را با نشر سیگنال لومینسانس به طور اختصاصی نشان می‌دهد. کاوشکر نوترکیب جدید با نام Rluc- (ZpA963)2 دارای توالی ژنی کد کننده افی بادی (ZpA963)2 در الحاق با توالی ژنی کد کننده رنیلا لوسیفراز (Rluc) است. بیان پروتئین در باکتری های اشریشیا کلی انجام شد و خالص سازی پروتئین به روش کروماتوگرافی تمایل انجام شد. مطالعات سینتیک آنزیمی نشان می دهد که Km آنزیم Rluc در ساختار کاوشگر جدید مشابه با آنزیم Rluc نوترکیب و به ترتیب 07/1 و 22/1 میکرومولار است. در نتیجه در نتیجه الحاق (ZpA963)2 به Rluc تمایل اتصال به سوبسترای کولنترازین تغییر نکرده است. همچنین مطالعات اتصال Rluc- (ZpA963)2 به استافیلوکوکوس اورئوس نشان می دهد کاوشگر جدید قابلیت اتصال به باکتری در دماهای 4 و 25 درجه سانتی گراد را به طور اختصاصی دارد و بیشترین سیگنال در استافیلوکوکوس اورئوس رشد کرده در محیط برین هارت براث مشاهده می شود. مطالعه حاضر ممکن است برای توسعه کیت های تجاری در آینده مورد استفاده قرار بگیرد. %U