@article { author = {Fazeli, Mostafa and Amoozegar, Mohammad Ali and Habibi Rezaei, Mehran and Siroosi, Maryam}, title = {Production of an extracellular halophilic Pullulanase By Halorubrum sp. Strain Ha25 Isolated From Aran- Bidgol Lake}, journal = {Cellular and Molecular Research (Iranian Journal of Biology)}, volume = {27}, number = {4}, pages = {533-545}, year = {2015}, publisher = {Iraninan Biology Society}, issn = {2383-2738}, eissn = {2383-2746}, doi = {2746}, abstract = {The industrial application of enzymes which can withstand in harsh condition such as high salinity and temperature has greatly increased. An extracellular halophilic and moderately thermophilic pullulanase was produced under stress conditions by a newly isolated extreme haloarchaeal strain designated as Ha25 in culture medium with 23% of total salt. 16S rRNA gene sequence analysis with phenotypic characterization places strain Ha25 in the genus Halorubrum. The enzyme production corresponded with growth and reached a maximum level during the mid-stationary phase. The isolate was capable of producing pullulanase in the presence of sodium chloride and the maximum enzyme production was at 3-4 M NaCl (85 U/ml). Optimum pH and temperature for enzyme production were 7.0 and 45 °C, respectively. Various carbon sources including maltose, starch and pullulan was inducing enzyme production, while glucose repressed production of enzyme. No cell growth and enzyme production was observed in the lack of Magnesium ions and the optimum concentration was 0.1 M. The maximum pullulanase activity was obtained in the medium containing 3 M NaCl at 50 °C, with 25% and 72% activity reductions at temperature 45 and 35°C, respectively. The optimum pH for activity of enzyme was 8.0, with 49.5% and 32.4% residual activities at pH 6 and 9, respectively.}, keywords = {pullulanase production,extreme halophilic archaea,Halorubrum,pullulan}, title_fa = {تولید پولولاناز نمک دوست خارج سلولی توسط Halorubrum Ha25 جدا شده از دریاچه پرشور آران و بیدگل}, abstract_fa = {تا کنون تلاش های متعددی در جهت جداسازی آنزیم هایی که در شرایط سخت صنعتی پایداراند از میکروارگانیسم های کران دوست از جمله نمک دوست صورت گرفته است. آرکی نمک دوست افراطی سویه Ha25، آنزیم پولولاناز خارج سلولی نمک دوست و گرمادوست نسبی را در شرایط پرتنش در محیط کشت دارای 23% نمک تام تولید می کند. تعیین توالی ژن S rRNA16 و ویژگی های فنوتیپی نشان داد سویه Ha25 متعلق به جنس Halorubrum است. تولید آنزیم با میزان رشد هماهنگ بود و در میانه فاز سکون به بیشترین میزان خود رسید. ترشح این آنزیم در حضور نمک سدیم کلراید صورت گرفته و در حضور غلظت 3 تا 4 مولار نمک NaCl بیشینه تولید آنزیم مشاهده شد (U/ml 85). دما و pH بهینه برای تولید آنزیم به ترتیب 45 درجه سانتی گراد و0/7 تعیین شد. منابع مختلف کربن مانند مالتوز، نشاسته و پولولان به عنوان القا کننده و گلوکوز به عنوان مهار کننده تولید آنزیم شناسایی شدند. غلظت بهینه منیزیوم برای تولید آنزیم 0.1 مولار بوده و این در حالی است که هیچ رشدی و متعاقب آن، هیچ تولیدی در عدم حضور یون های منیزیوم مشاهده نشد. بیشینه فعالیت آنزیم در حضور غلظت 3 مولار نمک NaCl و در دمای 50 درجه سانتی گراد بوده و در دمای 45 و 35 درجه سانتی گراد به ترتیب کاهش 25% و 72% در فعالیت آنزیم مشاهده شد. pH بهینه برای فعالیت آنزیم 8 بوده و در pH 6 و 9، به ترتیب 49.5% و 32.4% از فعالیت آنزیم باقی ماند.}, keywords_fa = {تولید پولولاناز,نمک دوست,آرکی نمک دوست افراطی,Halorubrum,پولولان}, url = {https://cell.ijbio.ir/article_442.html}, eprint = {https://cell.ijbio.ir/article_442_95b29390ea2438eb7bb31b1d5cf31db0.pdf} }