در این تحقیق برای اولین بار به شناسایی، استخراج و بررسی بیان ژنهای محافظ سلولی (لایفگارد) در هیدر آب شیرین Hydra Vulgaris پرداخته شده است. بدین منظور،100 عدد از پولیپهای هیدر آب شیرین پرورش یافته برای استخراج DNA مورد استفاده قرار گرفتند و جهت تکثیر ژنهای مورد نظر پرایمرهای خاص طراحی و واکنش PCR صورت گرفت. پس از تکثیر ژنهای محافظ سلولی، ...
بیشتر
در این تحقیق برای اولین بار به شناسایی، استخراج و بررسی بیان ژنهای محافظ سلولی (لایفگارد) در هیدر آب شیرین Hydra Vulgaris پرداخته شده است. بدین منظور،100 عدد از پولیپهای هیدر آب شیرین پرورش یافته برای استخراج DNA مورد استفاده قرار گرفتند و جهت تکثیر ژنهای مورد نظر پرایمرهای خاص طراحی و واکنش PCR صورت گرفت. پس از تکثیر ژنهای محافظ سلولی، به منظور بررسی محل بیان این ژنها، از تکنیک هیبریداسیون درجا با استفاده از دیگوکسیژنین استفاده شد. نتایج نشان داد که سه توالی از ژنهای محافظ سلولی به نامهای محافظ سلولی-4 و دو هومولوگ از محافظ سلولی-1 بیمهرگان در هیدر وجود دارد. هیبریداسیون درجا نشان داد که mRNA محافظ سلولی-4 در لایه اندودرم پولیپ در مراحل مختلف جوانه زدن مشاهده میشود. همچنین، این ژن در زمان تولیدمثل غیرجنسی و مراحل مختلف تخمکزایی در تخمدان پولیپ ماده بیان میگردد. درخت فیلوژنی مشخص نمود که ژنهای محافظ سلولی در سادهترین جانور حقیقی به صورت تثبیت شده وجود دارد و از آنجایی که مکانیسم مرگ برنامهریزی شده سلولی در گامتزایی هیدر (تولید تخمک و اسپرم) نقش دارد، بیان ژن محافظ سلولی-4 به عنوان ژن محافظ سلول در محلهایی که مرگ برنامهریزی شده سلولی نقش ایفا میکند، منطقی به نظر میرسد.